为了提高菊花抗冻能力，研究者从其他生物中克隆出抗冻基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。
回答下列问题：
（1）构建重组质粒时需要用到的工具酶为 限制性核酸内切酶和DNA连接酶（限制酶和DNA连接酶）限制性核酸内切酶和DNA连接酶（限制酶和DNA连接酶）。为使抗冻基因C在菊花细胞中高效表达，依据图2需要把目的基因片段插入表达载体的 启动子a启动子a和 终止子a终止子a之间。
（2）若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒作为载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是 目的基因无复制原点（目的基因无表达所需的启动子等）目的基因无复制原点（目的基因无表达所需的启动子等）（答出一点即可）。若想了解抗冻基因C是否整合到菊花染色体上，检测方法是采用 DNA分子杂交DNA分子杂交技术。
（3）科研工作者可以利用 PCR技术PCR技术获得更多的抗冻基因C，借助农杆菌将重组质粒导入菊花细胞，在该过程中需添加酚类物质，目的是 吸引农杆菌感染菊花细胞吸引农杆菌感染菊花细胞。
（4）若想获得完整的转基因植株。还需借助 植物组织培养植物组织培养技术。假如获得的转基因植株（抗冻基因C已经整合到菊花的基因组中）抗冻能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是 目的基因的转录或翻译异常目的基因的转录或翻译异常。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制性核酸内切酶和DNA连接酶（限制酶和DNA连接酶）；启动子a；终止子a；目的基因无复制原点（目的基因无表达所需的启动子等）；DNA分子杂交；PCR技术；吸引农杆菌感染菊花细胞；植物组织培养；目的基因的转录或翻译异常
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：48引用：4难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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