科学家对乳酸脱氢酶（LDH）进行了改造，使其能够高效地生产高纯度的苯乳酸。回答下列有关问题：
（1科学家改造乳酸脱氢酶时需要做的第一步是 预期蛋白质的功能或预期改造后的乳酸脱氢酶的功能预期蛋白质的功能或预期改造后的乳酸脱氢酶的功能。研究发现，要将LDH基因改造成为mLDH（改造后的乳酸脱氢酶）基因，需将LDH第52位的酪氨酸替换为亮氨酸，使得活性中心增大，才能用于生产苯乳酸。
①先将LDH基因片段连人载体中，形成环状质粒（如图1）。
将突变后的序列设计在引物1中，以环状质粒为PCR的 模板模板，再向体系中加入四种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、引物2引物2，以及碱基替换了的引物扩增LDH基因，PCR产物的序列便引入了预期的突变。
②上述PCR产物为链状DNA分子，改造后的LDH基因序列位于PCR产物的两侧，需要用 DNA连接酶DNA连接酶酶将产物两端连接，获得含有mLDH基因的质粒。
（2）产生苯乳酸的过程还需FDH酶参与。现需要构建同时含有mLDH、FDH的基因表达载体。请你根据图2，提出将两个基因依次连入载体的思路：先用NdeⅠ和XhoⅠ酶切割质粒2和空载体，将FDH基因与载体连接获得连接产物，再用NcoI和BamHⅠ酶切质粒1和上一步中的连接产物，将mLDH基因与载体连接获得基因表达载体（或先用NcoⅠ和BamHⅠ酶切割质粒1和空载体，将mLDH基因与载体连接获得连接产物，再用NdeI和XhoⅠ酶切割质粒2和上一步中的连接产物，将FDH基因与载体连接获得基因表达载体）先用NdeⅠ和XhoⅠ酶切割质粒2和空载体，将FDH基因与载体连接获得连接产物，再用NcoI和BamHⅠ酶切质粒1和上一步中的连接产物，将mLDH基因与载体连接获得基因表达载体（或先用NcoⅠ和BamHⅠ酶切割质粒1和空载体，将mLDH基因与载体连接获得连接产物，再用NdeI和XhoⅠ酶切割质粒2和上一步中的连接产物，将FDH基因与载体连接获得基因表达载体）（要体现选用的内切酶和连接的先后顺序）。
（3）上述科学实践属于生物工程中的 蛋白质蛋白质工程。在生命科学高速发展的今天，基因改造已十分成熟，但有一些红线不能触碰，请你举出一例我国明令禁止的生物工程应用：生殖性克隆、基因编辑定制婴儿或用生物工程制作生物武器等生殖性克隆、基因编辑定制婴儿或用生物工程制作生物武器等。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】预期蛋白质的功能或预期改造后的乳酸脱氢酶的功能；模板；引物2；DNA连接酶；先用NdeⅠ和XhoⅠ酶切割质粒2和空载体，将FDH基因与载体连接获得连接产物，再用NcoI和BamHⅠ酶切质粒1和上一步中的连接产物，将mLDH基因与载体连接获得基因表达载体（或先用NcoⅠ和BamHⅠ酶切割质粒1和空载体，将mLDH基因与载体连接获得连接产物，再用NdeI和XhoⅠ酶切割质粒2和上一步中的连接产物，将FDH基因与载体连接获得基因表达载体）；蛋白质；生殖性克隆、基因编辑定制婴儿或用生物工程制作生物武器等
【解答】
【点评】
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发布：2024/10/28 17:0:2组卷：10引用：2难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
