植物不能代谢亚磷酸盐(Phi),但导入并表达ptxD基因的转基因植物可将Phi转化为供作物生长发育所需的Pi,以获得更高产量。当施用Phi时,杂草不能与ptrD转基因农作物竞争可利用的磷,因此,ptxD转基因植株相比于杂草有明显的竞争优势。Phi不能被藻类代谢且对藻类没有毒性,施用后不会促进赤潮的发生,对水生生态系统生物多样性不构成威胁。油菜是我国重要的油料作物,油菜田间常伴生大量杂草,严重影响了油菜产量,除草剂长期过量使用,导致全球抗除草剂杂草数量逐年增加。为控制杂草和解决除草剂过量使用带来的问题,某研究团队将ptxD基因转入野生型油菜“Westar”(WT)中,获得转基因油菜。

(1)为获得大量的ptxD基因,过程b中需先加热至90-95℃然后冷却至55~60℃,冷却的目的是 使引物结合到互补DNA链上使引物结合到互补DNA链上。过程b循环完成后,通常会继续72℃延伸5-10分钟,其目的是 使子链延伸完全使子链延伸完全。
(2)为获得转基因植物,本实验采用 农杆菌转化农杆菌转化法侵染油菜幼苗的下胚轴,主要过程如下:
①过程d:将重组质粒导入农杆菌,得到含重组质粒的农杆菌菌液。
②将无菌培养的野生型油菜幼苗的下胚轴受体进行农杆菌侵染,侵染结束后进行一段时间的共培养,共培养的目的是 使农杆菌Ti质粒的T-DNA转移至受体细胞并整合到其染色体上使农杆菌Ti质粒的T-DNA转移至受体细胞并整合到其染色体上。
③过程f:共培养结束后转移至相应培养基上诱导愈伤。
④过程g:诱导分化、生根。
(3)本研究利用植物表达载体上的潮霉素抗性基因和 ptxDptxD基因作为筛选标记。可用潮霉素或 PhiPhi作为筛选剂。
(4)若在试管苗期间通过分子水平的检测,检验转基因油菜的ptxD基因是否表达,应检测 是否转录产生相应的mRNA、是否翻译产生相关的蛋白质是否转录产生相应的mRNA、是否翻译产生相关的蛋白质(答两点)
【答案】使引物结合到互补DNA链上;使子链延伸完全;农杆菌转化;使农杆菌Ti质粒的T-DNA转移至受体细胞并整合到其染色体上;ptxD;Phi;是否转录产生相应的mRNA、是否翻译产生相关的蛋白质
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:21引用:2难度:0.6
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