花青苷可以决定苹果果皮、果肉等颜色的鲜艳程度，研究人员欲研究BR对花青苷合成的影响及机制。
（1）BR（油菜素内酯）是一种天然植物激素，通过影响细胞基因的表达起到 调节调节作用。
（2）A2基因为花青苷合成相关基因，为探究BR与A2基因之间的关系，研究者使用BR处理了苹果幼苗，检测A2基因的表达水平结果如图1，该结果表明 BR促进A2基因表达BR促进A2基因表达。
（3）有人提出A2蛋白和R1蛋白会影响花青苷合成酶ANS基因启动子的活性。研究者通过检测荧光素酶的表达量来验证此推测，进行了相关研究。
①构建表达载体：请将选项的序号或字母填入图2相应的方框中。
启动子：
Ⅰ．A2基因启动子
Ⅱ．R1基因启动子
Ⅲ．ANS基因启动子
Ⅳ．荧光素酶基因启动子
Ⅴ．常规启动子
基因：
A．A2基因
B．R1基因
C．ANS基因
D．荧光素酶基因
②导入受体细胞：构建好的表达载体通过 农杆菌转化/基因枪法农杆菌转化/基因枪法法导入苹果愈伤组织。
③实验结果检测：实验结果如图3，结果表明 单独的A2蛋白抑制ANS基因转录，A2和R1蛋白都存在时抑制ANS基因转录效果更强（单独R1无显著影响）单独的A2蛋白抑制ANS基因转录，A2和R1蛋白都存在时抑制ANS基因转录效果更强（单独R1无显著影响）。
（4）双分子荧光互补技术可研究细胞内蛋白质之间是否相互作用。将黄色荧光蛋白基因分为2段（片段1与片段2），分别与可特异性结合的两种蛋白的基因融合构建表达载体，将两种载体同时导入受体细胞，在515nm激发光下可发出黄色荧光。研究者推测A2蛋白和R1蛋白在细胞内形成复合物发挥作用，进行如图4操作，请写出可验证此推测的实验现象。
| 实验过程 | 实验现象 |
载体组成 |
出现黄色荧光 出现黄色荧光
|
|
没有黄色荧光 没有黄色荧光
|
BR促进A2基因表达，A2蛋白增多，与R1蛋白形成复合物，作用于ANS基因的启动子，抑制其转录，抑制花青苷的合成
BR促进A2基因表达，A2蛋白增多，与R1蛋白形成复合物，作用于ANS基因的启动子，抑制其转录，抑制花青苷的合成
。【考点】基因工程的操作过程综合；其他植物激素的种类和作用．
【答案】调节；BR促进A2基因表达；农杆菌转化/基因枪法；单独的A2蛋白抑制ANS基因转录，A2和R1蛋白都存在时抑制ANS基因转录效果更强（单独R1无显著影响）；出现黄色荧光；没有黄色荧光；BR促进A2基因表达，A2蛋白增多，与R1蛋白形成复合物，作用于ANS基因的启动子，抑制其转录，抑制花青苷的合成
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：30引用：3难度：0.4
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