乳糖不耐受症是机体乳糖酶（LCT）分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹泻。科研工作者利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛，给乳糖不耐受症患者带来了福音。如图表示转基因低乳糖奶牛的培育流程。请据图分析回答下列问题。
（1）图中的重组质粒T中除了有目的基因外，还需要有 标记基因标记基因、复制原点复制原点启动子和终止子等。应选择图中的 BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ（限制酶）处理目的基因和质粒S。一般采用 显微注射显微注射法将重组质粒T导入牛胎儿成纤维细胞。
（2）目的基因导入牛胎儿成纤维细胞以后，从分子水平检测LCT基因是否表达出LCT，常采用的检测方法是 抗原—抗体杂交法抗原—抗体杂交法。
（3）图中除了采用了转基因技术外，涉及的生物技术还有 细胞核移植技术、早期胚胎的培养、胚胎移植技术等细胞核移植技术、早期胚胎的培养、胚胎移植技术等（答出两种即可）。图中的卵母细胞如果来自卵巢，则需要培养至 减数第二次分裂中期减数第二次分裂中期才能接受牛胎儿成纤维细胞的细胞核。早期胚胎能移植到代孕母牛的子宫并继续发育，其原因是 代孕母牛对移入子宫的胚胎不发生免疫排斥反应代孕母牛对移入子宫的胚胎不发生免疫排斥反应。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】标记基因；复制原点；BamHⅠ和HindⅢ；显微注射；抗原—抗体杂交法；细胞核移植技术、早期胚胎的培养、胚胎移植技术等；减数第二次分裂中期；代孕母牛对移入子宫的胚胎不发生免疫排斥反应
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：9引用：2难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
