番茄果实在成熟的过程中，多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成显著增加，以降解果胶使细胞壁破损，从而使果实变红变软，但不利于保鲜。科学家利用基因工程得到转基因番茄，大大延长果实保质期。操作流程如图，回答下列问题：
（1）利用RT-PCR技术即逆转录-多聚酶链式反应制备PG基因，最好从番茄的 果肉果肉细胞中提取mRNA，此技术所需要的酶主要有 逆转录酶和Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）逆转录酶和Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）。
（2）据图可知，转基因番茄主要通过抑制PG基因的 翻译翻译过程，使PG合成量减少，从而延长果实保质期。
（3）图中的农杆菌。能够在含 卡那霉素卡那霉素的培养基中生存，而在含 四环素四环素的培养基中不能生存的即为已转化的所需农杆菌。
（4）图中将反向连接PC基因导入番茄细胞的方法称为 农杆菌转化法农杆菌转化法。要检测感染农杆菌后的番茄细胞染色体DNA上是否插入了反向连接PC基因，不能不能（填“能”或“不能”）用标记的PG基因的单链作为探针进行检测，理由是 番茄细胞内原有的天然PG基因和插入的反向连接PG基因，均会与该探针形成杂交带番茄细胞内原有的天然PG基因和插入的反向连接PG基因，均会与该探针形成杂交带。
（5）在将转化的番茄细胞通过植物组织培养技术形成番茄幼苗过程中，培养基 要要（填“要”或“不要”）添加有机营养物质，原因是 该培养过程中植物细胞不能进行光合作用（或光合作用很弱）该培养过程中植物细胞不能进行光合作用（或光合作用很弱）。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】果肉；逆转录酶和Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）；翻译；卡那霉素；四环素；农杆菌转化法；不能；番茄细胞内原有的天然PG基因和插入的反向连接PG基因，均会与该探针形成杂交带；要；该培养过程中植物细胞不能进行光合作用（或光合作用很弱）
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：18引用：2难度：0.7
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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