为了棉花姓“中国”,中国科学家锐意进取,奋发图强,先后独立开发拥有自主知识产权的Bt抗虫蛋白单价、双价和融合基因等多项技术,仅用10年时间就实现了抗虫棉市场占有率的逆转。根据基因工程的有关知识,回答下列问题:
(1)转基因棉的培育过程中,Bt抗虫蛋白基因属于 目的基因目的基因。用限制性内切核酸酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有 黏性末端黏性末端和 平末端平末端。
(2)质粒载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:
……GAATTC……
……CTTAAG……
为使载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切核酸酶切割,该酶必须具有的特点是 切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的末端相同切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的末端相同。
(3)PCR技术可在体外大量扩增目的基因。该技术所需的DNA聚合酶具有 耐高温耐高温的特点,若扩增n次,共需引物 2n+1-22n+1-2个。扩增出的DNA片段,常用 琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳进行鉴定,至少需要 三三次循环才能获取与目的基因等长的片段。
(4)将表达载体导入受体细胞时,中国科学家首创的导入方法是 花粉管通道法花粉管通道法。
(5)目的基因进入受体细胞后,还需要进行检测和鉴定,通常我们用 抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交检测目的基因是否翻译出相关蛋白质。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定.
【答案】目的基因;黏性末端;平末端;切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的末端相同;耐高温;2n+1-2;琼脂糖凝胶电泳;三;花粉管通道法;抗原-抗体杂交
【解答】
【点评】
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