人乳铁蛋白（hLF）对细菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人员开展人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体构建及转染研究，主要流程如图，图中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相关限制酶切点，neor为新霉素抗性基因，BLG基因为β-乳球蛋白基因，GFP基因为绿色荧光蛋白基因。请回答：
（1）过程①中，不能从人肌肉细胞中提取RNA用于RT-PCR，是因为hLF基因在人肌肉细胞中不转录（表达）hLF基因在人肌肉细胞中不转录（表达）。在RT-PCR过程中，加入的引物需在5'端添加SalI和BamHISalI和BamHI两种限制酶的识别序列，以便于hLF基因插入pEB中。
（2）过程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是使人乳铁蛋白基因在山羊的乳腺细胞中表达使人乳铁蛋白基因在山羊的乳腺细胞中表达。过程③中，使用人工膜制成的脂质体将重组质粒导入受体细胞，依据的主要原理是生物膜具有一定的流动性生物膜具有一定的流动性。
（3）将转染后的山羊乳腺上皮细胞先置于含新霉素的培养液中培养，能够存活的细胞应该是导入pEB质粒或pEBL质粒pEB质粒或pEBL质粒的细胞，再利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞中是否有绿色荧光是否有绿色荧光，以筛选出转染成功的细胞。
（4）要获得转基因山羊，还需要将成功表达hLF的乳腺上皮细胞的细胞核移植到山羊去核的卵母去核的卵母细胞中，再借助早期胚胎培养和胚胎移植早期胚胎培养和胚胎移植技术孕育出羊羔。
【考点】体外受精和胚胎移植．
【答案】hLF基因在人肌肉细胞中不转录（表达）；SalI和BamHI；使人乳铁蛋白基因在山羊的乳腺细胞中表达；生物膜具有一定的流动性；pEB质粒或pEBL质粒；是否有绿色荧光；去核的卵母；早期胚胎培养和胚胎移植
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/6/27 10:35:59组卷：47引用：2难度：0.7
相关试卷
