人乳铁蛋白是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白。乳铁蛋白不仅参与铁的转运，而且具有广谱抗菌抗氧化、抗癌、调节免疫系统等强大生物功能。如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：
（1）若用PCR技术扩增人乳铁蛋白基因，其前提条件是有一段人乳铁蛋白基因（目的基因）的核苷酸序列人乳铁蛋白基因（目的基因）的核苷酸序列，以便合成相应的引物，合成的引物能与待扩增区段两端两端（中间/两端/左端/右端）的DNA序列彼此互补。
（2）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用HindⅢ和BamHIHindⅢ和BamHI限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含氨苄青霉素氨苄青霉素的培养基上进行。经过两种培养基培养后再从DD处（填字母），挑出大肠杆菌扩增带有外源DNA的重组载体。为使人乳铁蛋白基因在牛的乳腺细胞中特异性表达，应在基因的上游插入牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件。
（3）过程②的代孕牛需要进行同期发情同期发情处理。若需获得多头转基因牛可对早期胚胎进行分割，对囊胚进行分割时需要注意将内细胞团均等分割将内细胞团均等分割。
（4）为检测转基因牛的乳汁中是否含有人乳铁蛋白，可采用抗原抗体杂交抗原抗体杂交技术。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】人乳铁蛋白基因（目的基因）的核苷酸序列；两端；HindⅢ和BamHI；氨苄青霉素；D；牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件；同期发情；将内细胞团均等分割；抗原抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：17引用：2难度：0.7
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