Ⅰ型糖尿病是因免疫系统将自身胰岛素作为抗原识别而引起的自身免疫病。小肠黏膜长期少量吸收胰岛素抗原，能诱导免疫系统识别该抗原后应答减弱，从而缓解症状。科研人员利用Ⅰ型糖尿病模型小鼠进行动物实验，使乳酸菌在小鼠肠道内持续产生人胰岛素抗原，为此构建重组表达载体，技术路线如图1。
据图回答：
（1）为使人胰岛素在乳酸菌中高效表达，需改造其编码序列。图2是改造前后人胰岛素B链编码序列的起始30个核苷酸序列。据图分析，转录形成的mRNA中，该段序列所对应的片段内存在碱基替换的密码子数有 66个。
（2）在人胰岛素A、B肽链编码序列间引入一段短肽编码序列，确保等比例表达A、B肽链。下列有关分析正确的是 ABCDABCD。
A．引入短肽编码序列不能含终止子序列
B．引入短肽编码序列不能含终止密码子编码序列
C．引入短肽不能改变A链氨基酸序列
D．引入短肽不能改变原人胰岛素抗原性
（3）在重组表达载体中，SacⅠ和XbaⅠ限制酶仅有图示的酶切位点。用这两种酶充分酶切重组表达载体，可形成 33种DNA片段。质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有 ①自我复制；②带有特殊的标记基因③具有一个至多个限制酶切点①自我复制；②带有特殊的标记基因③具有一个至多个限制酶切点（答出两点即可）
（4）检测转化的乳酸菌发现，信号肽—重组人胰岛素分布在细胞壁上。由此推测，信号肽的合成和运输所经历的细胞结构依次是 核糖体、细胞质基质、细胞膜、细胞壁核糖体、细胞质基质、细胞膜、细胞壁。
（5）Ⅰ型糖尿病也可以通过核移植技术进行治疗。目前核移植技术中普遍使用的去核方法是 显微操作显微操作法，还有人采用梯度离心，紫外光短时间照射、化学物质处理等方法，这些方法是在没有刺破透明带或卵母细胞质膜的情况下，去除细胞核或使卵细胞核 DNA变性DNA变性，从而达到去核的目的。
【答案】6；ABCD；3；①自我复制；②带有特殊的标记基因③具有一个至多个限制酶切点；核糖体、细胞质基质、细胞膜、细胞壁；显微操作；DNA变性
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：22引用：3难度：0.5
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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