进行乙肝疫苗的注射，可以有效地预防乙肝的发病。如图为“乙肝基因工程疫苗”的生产和使用过程图解，质粒上箭头所指部位为相应的限制酶的切割位点。质粒中lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal,使菌落显现出蓝色；若无该基因，菌落则显现出白色。请回答下列问题：
（1）在基因工程中使用的基本工具除载体外，还有 限制限制酶和 DNA连接DNA连接酶。
（2）为了制备乙肝疫苗，可以通过基因工程技术生产。基因工程的基本操作流程是 目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因以及目的基因表达的检测鉴定。目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因以及目的基因表达的检测鉴定。（用文字和箭头表示）。
（3）据图分析构建基因表达载体时，切割含有目的基因的DNA片段不宜使用EcoRⅤ酶，原因是 用EcoRⅤ酶切割会破坏青霉素抗性基因，影响筛选用EcoRⅤ酶切割会破坏青霉素抗性基因，影响筛选。
（4）筛选转基因成功的大肠杆菌，需要在培养液中加入 青霉素青霉素和 X-galX-gal；如果出现白菌落，说明基因表达载体成功转入大肠杆菌，解释重组质粒中lacZ基因不存在的原因是 构建基因表达载体时应该选用限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ进行切割，这样会破坏lacZ基因构建基因表达载体时应该选用限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ进行切割，这样会破坏lacZ基因。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制；DNA连接；目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因以及目的基因表达的检测鉴定。；用EcoRⅤ酶切割会破坏青霉素抗性基因，影响筛选；青霉素；X-gal；构建基因表达载体时应该选用限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ进行切割，这样会破坏lacZ基因
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：1引用：1难度：0.7
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
