以我国科学家为主的科研团队将OSNL(即4个基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的缩写)导入黑羽鸡胚成纤维细胞(CEFs),诱导其重编程为诱导多能干细胞(iPS),再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞(iPGCs),然后将iPGCs注射到孵化2.5天的白羽鸡胚血管中,最终获得具有黑羽鸡遗传特性的后代,实验流程如图。回答下列问题。
(1)CEFs是从孵化9天的黑羽鸡胚中分离获得的,为了获得单细胞悬液,鸡胚组织剪碎后需用 胰蛋白酶、胶原蛋白酶胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加 动物血清动物血清等天然成分,以满足细胞对某些细胞因子的需求。
(2)体外获取OSNL的方法有 PCR技术PCR技术(答出1种即可)。若要在CEFs中表达外源基因的蛋白,需构建基因表达载体,载体中除含有目的基因和标记基因外,还须有启动子和 终止子终止子等。启动子是 RNA聚合酶RNA聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动 目的基因转录出mRNA,最终表达出所需要的蛋白质目的基因转录出mRNA,最终表达出所需要的蛋白质。
(3)iPS细胞和iPGCs细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是 基因的选择性表达基因的选择性表达。
(4)该实验流程中用到的生物技术有 基因工程、动物细胞培养等基因工程、动物细胞培养等(答出1点即可)。
【考点】动物细胞培养的条件与过程;动物细胞核移植技术.
【答案】胰蛋白酶、胶原蛋白酶;动物血清;PCR技术;终止子;RNA聚合酶;目的基因转录出mRNA,最终表达出所需要的蛋白质;基因的选择性表达;基因工程、动物细胞培养等
【解答】
【点评】
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