生物技术及生命科学的应用
解脂芽孢杆菌产多种脂肪酶，后者广泛用于日用化工和食品工业，因此利用生物技术规模化生产脂肪酶有重要意义。图1为解脂芽孢杆菌拟核DNA中某分泌型脂肪酶编码基因（LP）的定位及所用质粒DNA的有关信息，图中BamHⅠ、EcoRⅠ、MboⅠ均为限制酶。图2为固定化与非固定化脂肪酶的相对酶活性与温度的关系。
（1）基于上述信息，该项基因工程的目的基因是 某分泌型脂肪酶编码基因（或LP）某分泌型脂肪酶编码基因（或LP）。为了与质粒DNA合理重组，解脂芽孢杆菌拟核DNA和质粒DNA均应用限制酶 EcoR1EcoR1切割。
（2）由上述基因工程改造过的细菌规模化生产并提纯分泌型脂肪酶，需要加入硫酸铵使酶蛋白与其他杂质分离，这属于酶分离提纯步骤中的 沉淀沉淀。
（3）为了便于重复使用，上述制得的脂肪酶往往要固定化。比较图2的两条曲线，写出固定化酶的优势是 固定化酶的活性随温度升高而升高，在45-60℃时酶的固定化活性最高固定化酶的活性随温度升高而升高，在45-60℃时酶的固定化活性最高，劣势是 在30-40℃，固定化酶的活性比非固定化酶活性低在30-40℃，固定化酶的活性比非固定化酶活性低。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】某分泌型脂肪酶编码基因（或LP）；EcoR1；沉淀；固定化酶的活性随温度升高而升高，在45-60℃时酶的固定化活性最高；在30-40℃，固定化酶的活性比非固定化酶活性低
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：78引用：1难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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