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酵母菌的转录因子蛋白由BD和AD两部分组成且结合在一起。BD负责与启动子上游序列结合,AD负责激活启动子转录。只有AD和BD同时存在且结合在一起时才能保证基因M的转录(如图所示)。基因M能表达时,酵母菌才能在缺乏组氨酸的培养基上生长。

(1)酵母菌培养基一般都含有水、碳源、
氮源
氮源
和无机盐等营养物质,在酵母菌的纯培养过程中,采用
平板划线法或稀释涂布平板
平板划线法或稀释涂布平板
法能将单个微生物分散在固体培养基上。
(2)将BD与AD分开,BD基因与X基因共连一个载体,可表达出BD-X融合蛋白;AD基因与Y基因共连一个载体,可表达出AD-Y融合蛋白。将两个载体同时导入一个酵母细胞中,可以检测X蛋白与Y蛋白是否存在相互作用(即是否可以结合),这种检测方法称为酵母双杂交。
①从到酵母细胞中提取蛋白质,进行
抗原-抗体
抗原-抗体
杂交,以检测是否产生M蛋白。若将酵母菌培养在
缺乏组氨酸
缺乏组氨酸
培养基中,酵母菌仍然可以生长,则说明
X蛋白与Y蛋白存在相互作用
X蛋白与Y蛋白存在相互作用

②在酵母双杂交的检测中可能出现假阳性的结果,原因是
X蛋白具有激活启动子转录的活性(或X蛋白具有激活启动子转录的功能或X蛋白具有AD蛋白的功能)
X蛋白具有激活启动子转录的活性(或X蛋白具有激活启动子转录的功能或X蛋白具有AD蛋白的功能)

【答案】氮源;平板划线法或稀释涂布平板;抗原-抗体;缺乏组氨酸;X蛋白与Y蛋白存在相互作用;X蛋白具有激活启动子转录的活性(或X蛋白具有激活启动子转录的功能或X蛋白具有AD蛋白的功能)
【解答】
【点评】
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