酵母菌的转录因子蛋白由BD和AD两部分组成且结合在一起。BD负责与启动子上游序列结合,AD负责激活启动子转录。只有AD和BD同时存在且结合在一起时才能保证基因M的转录(如图所示)。基因M能表达时,酵母菌才能在缺乏组氨酸的培养基上生长。

(1)酵母菌培养基一般都含有水、碳源、氮源氮源和无机盐等营养物质,在酵母菌的纯培养过程中,采用 平板划线法或稀释涂布平板平板划线法或稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上。
(2)将BD与AD分开,BD基因与X基因共连一个载体,可表达出BD-X融合蛋白;AD基因与Y基因共连一个载体,可表达出AD-Y融合蛋白。将两个载体同时导入一个酵母细胞中,可以检测X蛋白与Y蛋白是否存在相互作用(即是否可以结合),这种检测方法称为酵母双杂交。
①从到酵母细胞中提取蛋白质,进行 抗原-抗体抗原-抗体杂交,以检测是否产生M蛋白。若将酵母菌培养在 缺乏组氨酸缺乏组氨酸培养基中,酵母菌仍然可以生长,则说明 X蛋白与Y蛋白存在相互作用X蛋白与Y蛋白存在相互作用。
②在酵母双杂交的检测中可能出现假阳性的结果,原因是 X蛋白具有激活启动子转录的活性(或X蛋白具有激活启动子转录的功能或X蛋白具有AD蛋白的功能)X蛋白具有激活启动子转录的活性(或X蛋白具有激活启动子转录的功能或X蛋白具有AD蛋白的功能)。
【考点】微生物的纯培养;基因工程的操作过程综合.
【答案】氮源;平板划线法或稀释涂布平板;抗原-抗体;缺乏组氨酸;X蛋白与Y蛋白存在相互作用;X蛋白具有激活启动子转录的活性(或X蛋白具有激活启动子转录的功能或X蛋白具有AD蛋白的功能)
【解答】
【点评】
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