鱼腥草具有清热解毒的功能。人工栽培的鱼腥草易感染病菌，使其抗病能力降低，影响产量和质量。抗菌肽对细菌有很强的杀伤作用，研究人员为获得转抗菌肽基因鱼腥草进行了相关实验，流程如图。
回答下列问题：
（1）步骤①选择HindⅢ与SacⅠ两种限制酶切割目的基因，这两种酶作用的部位是 磷酸二酯键磷酸二酯键。切割质粒的限制酶要与切割目的基因的限制酶 相同相同（填“相同”或“不相同”）。
（2）常用 PCRPCR技术扩增目的基因。不能直接将目的基因导入受体细胞的原因是 目的基因无复制原点；目的基因无表达所需启动子、终止子等目的基因无复制原点；目的基因无表达所需启动子、终止子等。
（3）进行步骤②时，将 氯化钙氯化钙处理过的农杆菌与重组质粒混合，使重组质粒转入农杆菌，完成转化。
（4）将步骤②获得的农杆菌在含潮霉素的培养基上培养，能繁殖出菌落的不仅是含重组质粒的农杆菌，还可能是 只含质粒载体的农杆菌只含质粒载体的农杆菌。
（5）若抗菌肽基因已经整合到鱼腥草的基因组中，但转基因鱼腥草的抗病能力没有提高，可用 分子杂交分子杂交技术检测抗菌肽基因是否正常表达：转基因鱼腥草抗病能力没有提高的原因还可能是 表达得到的抗菌肽没有活性表达得到的抗菌肽没有活性。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】磷酸二酯键；相同；PCR；目的基因无复制原点；目的基因无表达所需启动子、终止子等；氯化钙；只含质粒载体的农杆菌；分子杂交；表达得到的抗菌肽没有活性
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：5引用：1难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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