科研人员通过转基因技术培育出超量表达P蛋白的转基因甜玉米。在超量表达P基因载体的构建中，含P基因的DNA片段以及Ti质粒的酶切位点如图所示，其中强启动子能驱动基因的持续转录。请回答下列问题。
（1）以RNA为模板，通过RT-PCR技术可获取P基因。进行RT-PCR时一般要加入4种脱氧核糖核苷三磷酸（dNTP）而不是脱氧核苷酸，其原因是 dNTP能为子链延伸过程提供能量和原料dNTP能为子链延伸过程提供能量和原料，同时需加入的酶有了特异性扩增P基因序列，需根据 P基因两端的碱基序列P基因两端的碱基序列设计特异性引物。
（2）在构建基因表达载体时，应优先选用的限制酶是 BamHIBamHI和 SacISacI这样操作不仅使P基因在玉米植株中超量表达，还可利用T-DNA的 可转移可转移特性，最终使P基因 整合到玉米细胞染色体上整合到玉米细胞染色体上。
（3）对转基因再生玉米植株进行鉴定时发现，有些植株虽有P基因，但几乎没有P蛋白，造成该现象的原因可能有 基因转化过程中强启动子可能丢失或断裂，未能真正转化成功；虽然转化成功，但是P基因保持沉默，不能有效表达基因转化过程中强启动子可能丢失或断裂，未能真正转化成功；虽然转化成功，但是P基因保持沉默，不能有效表达。
| 限制酶 | 识别序列 |
| ClaⅠ | 5′-AT↓CGAT-3′ |
| BamHⅠ | 5′-G↓GATCC-3′ |
| HindⅢ | 5′-A↓AGCTT-3′ |
| EcoRⅠ | 5′-G↓AATTC-3′ |
| KpnⅠ | 5′-GGTAC↓C-3′ |
| SacⅠ | 5′-GAGCT↓C-3′ |
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】dNTP能为子链延伸过程提供能量和原料；P基因两端的碱基序列；BamHI；SacI；可转移；整合到玉米细胞染色体上；基因转化过程中强启动子可能丢失或断裂，未能真正转化成功；虽然转化成功，但是P基因保持沉默，不能有效表达
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/4/20 14:35:0组卷：8引用：1难度：0.5
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
