烟草是有重要经济价值的双子叶植物，易受TMV（烟草花叶病毒）感染而大幅度减产。绞股蓝细胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMV感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，操作流程如图所示。回答下列问题：
（1）过程①的产物可构建 cDNA（或部分基因文库）cDNA（或部分基因文库）文库，进而获得所需目的基因，该文库不同于基因组文库的特点有 文库较小、基因中没有启动子、基因中没有内含子、只含某种生物部分基因、全部基因可在物种间进行交流文库较小、基因中没有启动子、基因中没有内含子、只含某种生物部分基因、全部基因可在物种间进行交流（答出三点即可）。
（2）大量扩增目的基因可以使用PCR技术，该技术包括变性、复性、延伸三个步骤，变性这一步骤的目的是 使DNA解旋（为单链）使DNA解旋（为单链）。
（3）在构建基因表达载体时，常用两种不同的限制酶切割目的基因和质粒，获得不同的黏性末端，其主要目的是 防止目的基因或质粒自身环化防止目的基因或质粒自身环化。
（4）过程④最常用的方法是 农杆菌转化法农杆菌转化法。
（5）过程⑥还需要进行基因工程操作步骤中的 目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定，其中，在个体水平上检验获得的烟草是否抗TMV的方法是 用TMV感染烟草，观察烟草是否被感染（或患病）用TMV感染烟草，观察烟草是否被感染（或患病）。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】cDNA（或部分基因文库）；文库较小、基因中没有启动子、基因中没有内含子、只含某种生物部分基因、全部基因可在物种间进行交流；使DNA解旋（为单链）；防止目的基因或质粒自身环化；农杆菌转化法；目的基因的检测与鉴定；用TMV感染烟草，观察烟草是否被感染（或患病）
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：21引用：1难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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