干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病，其血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体异性最强，影响最显著。科研人员为建立抗SSB抗体全自动定量检测的磁微粒化学发光试剂，利用基因工程技术获得重组SSB蛋白，流程如图，请分析回答：
（1）利用RNA通过①过程获得cDNA需要 逆转录逆转录酶。通过PCR技术扩增SSB基因的前提是要测定该基因两端部分核苷酸序列，目的是 便于合成引物便于合成引物。
（2）为确保与PET41a质粒定向连接，获得的SSB基因两端要含有 BamHI和XhoⅠBamHI和XhoⅠ酶切位点。在PCR过程中，第 三三轮循环产物中出现含所需限制酶的片段A。
（3）获得含SSB基因的重组质粒后，进行如下实验切割原质粒和重组质粒，获得片段大小如下表（1kb=1000碱基对）（注意：DNA片段大小与图中所画比例一致）。SSB基因的长度为 3kb3kb。
| 限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ和XhoⅠ |
| 原质粒 | 8.1kb | 2.7kb、5.4kb |
| 重组质粒 | 3.4kb、5.0kb | 未做该处理 |
卡那霉素
卡那霉素
的培养基上，收集菌落进行鉴定，将阳性菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，筛选得到重组SSB蛋白。（5）为检测重组质粒表达情况及重组蛋白与抗体结合能力，科研人员通过注射含纯化的重组SSB蛋白的弗氏佐剂进行如下实验，请完成下表：
| 实验步骤 | 实验操作 |
| 分组 | 取健康、生理状态相同的小鼠随机均分成两组。 |
| 实验处理 | 实验组注射含纯化的重组SSB蛋白的弗氏佐剂，对照组① 注射等量不含重组SSB蛋白的弗氏佐剂 注射等量不含重组SSB蛋白的弗氏佐剂 ，连续三次。 |
| 饲养 | 在相同且适宜环境中饲养。 |
| ② 检测（获取实验结果） 检测（获取实验结果） |
第三次免疫后第七天取小鼠血清并提取抗体进行检测。 |
| 结果分析 | 与对照组相比，若抗体检测呈③ 阳性 阳性 ，则表明重组SSB蛋白具有与相应抗体高度结合的能力。 |
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】逆转录；便于合成引物；BamHI和XhoⅠ；三；3kb；卡那霉素；注射等量不含重组SSB蛋白的弗氏佐剂；检测（获取实验结果）；阳性
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/6/27 10:35:59组卷：25引用：1难度：0.5
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
