如图所示为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因（能使含该基因的大肠杆菌菌落呈蓝色）。图中EcoRⅠ、PvuⅠ为两种限制酶，括号内的数字表示限制酶切割位点与复制原点的距离。请据图分析并回答问题：
（1）若需获得图中目的基因，可选用PvuⅠPvuⅠ限制酶。
（2）片段D是目的基因中的某一片段，下列叙述错误的有abcabc（填字母）。
a.该图中含有两个密码子
b.图中③和④代表两个不同的脱氧核苷酸
c.若只用该片段中的3个碱基对，可以排列出43种片段
d.DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处，解旋酶作用中①处
（3）图中最适合作为目的基因运载体的质粒是B，而A、C两种质粒不能作为运载体的理由分别是A缺少标记基因；质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被限制酶切割，会影响重组质粒的自主复制A缺少标记基因；质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被限制酶切割，会影响重组质粒的自主复制。
（4）用目的基因和质粒B构建重组质粒后用EcoRⅠ完全酶切并进行电泳观察，可出现长度为1.1kb和5.65.6kb,或者3.13.1kb和3.63.6kb的片段。（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计）
（5）将分别用限制酶PvuⅠ切开的质粒B溶液与目的基因溶液混合，加入DNA连接酶连接后，并进行导入大肠杆菌受体细胞的操作之后，从菌落的颜色和对抗生素抗性的角度分析，受体细胞的类型有33种。若菌落表现为具有氨苄青霉素抗性、不呈蓝色，说明导入对应受体细胞的DNA为重组质粒（或质粒B-目的基因连接）或质粒B-质粒B反向连接重组质粒（或质粒B-目的基因连接）或质粒B-质粒B反向连接。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】PvuⅠ；abc；A缺少标记基因；质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被限制酶切割，会影响重组质粒的自主复制；5.6；3.1；3.6；3；重组质粒（或质粒B-目的基因连接）或质粒B-质粒B反向连接
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：48引用：2难度：0.6
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