黄瓜花叶病毒（CMV）是能侵染多种植物的RNA病毒，可危害番茄的正常生长并造成减产。研究人员通过农杆菌介导将该病毒外壳蛋白的cDNA导入番茄植株中，成功获得抗CMV的番茄植株。
（1）获得CMV的RNA后，需在逆转录逆转录酶的催化下才能合成CMV外壳蛋白的cDNA。
（2）获得cDNA后，需先通过一定方法将其插入到农杆菌Ti质粒的T-DNAT-DNA片段中，然后将番茄子叶切段与该农杆菌共同培养，以实现对番茄细胞的转化。
（3）将经共同培养后的番茄外植体接种于含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上培养一段时间，只有部分外植体生出愈伤组织。研究人员据此确定这些生出愈伤组织的外植体都已成功导入了cDNA，你认为他们做出以上判断的理由是重组表达载体同时含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功导入了重组质粒的外植体才能在含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上生出愈伤组织重组表达载体同时含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功导入了重组质粒的外植体才能在含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上生出愈伤组织。愈伤组织经再分化再分化长出小芽后还需要转入生根培养基生根培养基诱导生根。
（4）要想确定转基因番茄已经成功表达出CMV外壳蛋白，需要进行抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交实验。
（5）研究人员用强致病力的CMV分别感染转基因番茄与未转基因的番茄未转基因的番茄，通过对照发现转基因番茄具有较好的抗CMV能力。转基因番茄自交，子代中抗性植株与敏感植株数量之比接近3：1，由此可以得出的结论是目的基因已经整合到受体细胞的染色体上目的基因已经整合到受体细胞的染色体上；获得的转基因亲本为杂合子获得的转基因亲本为杂合子（答出两点）。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】逆转录；T-DNA；重组表达载体同时含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功导入了重组质粒的外植体才能在含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上生出愈伤组织；再分化；生根培养基；抗原-抗体杂交；未转基因的番茄；目的基因已经整合到受体细胞的染色体上；获得的转基因亲本为杂合子
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：9引用：3难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
