人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。通过基因工程技术可以大量制备药物t-PA。
（1）研究人员采用PCR技术可以获得大量t-PA基因，PCR的原理是 DNA半保留复制DNA半保留复制。扩增时，需要先根据 t-PA基因的核苷酸序列t-PA基因的核苷酸序列设计引物。在制备高质量t-PA基因模板时，可以用高温处理的方法去除蛋白质，原因是 蛋白质在高温条件下会变性失活，而DNA虽然在高温时会变性，但在低温时又会复性蛋白质在高温条件下会变性失活，而DNA虽然在高温时会变性，但在低温时又会复性。
（2）研究表明，为心梗患者注射限制酶识别序列和切割位点大量t-PA会诱发颅内出血，其原因在于t-PA与纤维蛋白结合的特异性不高。若将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。如图表示相关的目的基因、限制酶及抗性基因。
①改良药物t-PA的生产过程，
实质是对现有蛋白质进行改造的过程，它必须通过 改造或合成基因改造或合成基因来实现，原因主要是 改造后的基因可以遗传给下一代，而被改造的蛋白质无法遗传改造后的基因可以遗传给下一代，而被改造的蛋白质无法遗传。
②基因工程最核心的步骤是基因表达载体的构建，其目的是 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代；同时使目的基因能够表达和发挥作用使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代；同时使目的基因能够表达和发挥作用中，需选用限制酶 XmaⅠ和NheⅠXmaⅠ和NheⅠ 切开质粒，才能与t-PA改良基因高效连接。
③在筛选过程中，应该选择不含 neorneor的大肠杆菌作为受体细胞，以便在选择培养基中筛选出导入基因表达载体的大肠杆菌。简要写出筛选的思路为 将大肠杆菌涂布到含有新霉素的选择培养基上，从长出的每个单菌落中挑取部分大肠杆菌转涂到含有四环素的培养基上，不能生长的是导入成功的大肠杆菌将大肠杆菌涂布到含有新霉素的选择培养基上，从长出的每个单菌落中挑取部分大肠杆菌转涂到含有四环素的培养基上，不能生长的是导入成功的大肠杆菌。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】DNA半保留复制；t-PA基因的核苷酸序列；蛋白质在高温条件下会变性失活，而DNA虽然在高温时会变性，但在低温时又会复性；改造或合成基因；改造后的基因可以遗传给下一代，而被改造的蛋白质无法遗传；使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代；同时使目的基因能够表达和发挥作用；XmaⅠ和NheⅠ；neor；将大肠杆菌涂布到含有新霉素的选择培养基上，从长出的每个单菌落中挑取部分大肠杆菌转涂到含有四环素的培养基上，不能生长的是导入成功的大肠杆菌
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：3引用：1难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
