β-葡萄糖苷酸酶（GUS）基因来自大肠杆菌。转GUS基因的植物组织浸泡在含有某底物的缓冲液中，GUS能与底物发生反应，使植物组织呈现蓝色。研究人员利用转GUS基因的葡萄植株，以探究干旱条件对葡萄P启动子的功能是否有诱导作用。请回答：
（1）葡萄P启动子是 RNA聚合酶RNA聚合酶识别并结合的位点。欲获得葡萄P启动子，可根据 一段已知P启动子的核苷酸序列一段已知P启动子的核苷酸序列设计引物，利用该引物和从葡萄细胞获取的 DNADNA为模板进行PCR扩增。
（2）将葡萄P启动子与GUS基因等元件构建基因表达载体，利用 农杆菌转化法（基因枪法）农杆菌转化法（基因枪法）方法将该基因表达载体导入葡萄愈伤组织，葡萄愈伤组织在培养基中经 再分化再分化后，进而发育形成转基因葡萄植株。
（3）取上述转基因葡萄植株分为A、B两组，A组置于正常条件（无干旱处理）下培养，B组置于干旱条件下培养。一段时间后分别取A、B组葡萄植株幼根，浸泡在含有底物的缓冲液中，观察幼根颜色变化情况。请预测实验现象及相关结论。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】RNA聚合酶；一段已知P启动子的核苷酸序列；DNA；农杆菌转化法（基因枪法）；再分化
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：0引用：1难度：0.7
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发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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