如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体流程如图（以EcoRⅠ酶切为例）：
请据图回答问题：
（1）步骤Ⅰ用的EcoRⅠ是一种限制性核酸内切（或限制）限制性核酸内切（或限制）酶，它通过识别特定的核苷酸序列核苷酸序列切割特定位点。
（2）步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3′-羟基与5′-磷酸间形成磷酸二酯键磷酸二酯键；PCR循环中，升温到95℃是为了获得DNA单链DNA单链；Taq DNA聚合酶的作用是催化以DNA为模板的DNA链的延伸以DNA为模板的DNA链的延伸。
（3）若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是②④②④（从引物①②③④中选择，填编号）。
| DNA序列（虚线处省略了部分核苷酸序列） | |
| 已知序列 |  |
| PCR引物 | ①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′ ②5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′ ③5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′ ④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′ |
B
B
。A．5′-AACTATGCG----------AGCCCTT-3′
B．5′-AATTCCATG----------CTGAATT-3′
C．5′-GCAATGCGT----------TCGGGAA-3′
D．5′-TTGATACGC----------CGAGTAC-3′
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】限制性核酸内切（或限制）；核苷酸序列；磷酸二酯键；DNA单链；以DNA为模板的DNA链的延伸；②④；B
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：470引用：3难度：0.5
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1．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
2．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：3引用：3难度：0.7
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