随着全球转基因作物大规模种植和全球一体化下频繁的贸易流通，转基因监管的任务将越来越重。为了还给消费者知情权和选择权，多个国家和地区对转基因产品实行标识管理制度，这些法规实施的前提就是要建立稳定、准确的转基因检测技术。PCR转基因检测技术被多国检测工作者使用，该技术通常包括核酸提取、核酸扩增、扩增产物检测3个步骤。某研究小组设计并完成了“转基因抗草甘膦大豆定性PCR检测”实验，请参与实验设计并回答相关问题（草甘膦为常用除草剂；转基因抗草甘膦大豆的外源基因构建图如图1所示）：
（1）提取DNA：取待测大豆组织裂解破碎，进行DNA提取和纯化，得到待测大豆基因组DNA。该过程的常用的试剂有EDTA、SDS、NaCl、酒精等。在研磨液中加入NaCl的目的是 溶解DNA溶解DNA，提取到的DNA可以用 二苯胺二苯胺试剂鉴定。
（2）DNA扩增：
①在确定扩增对象后，从 序列数据库序列数据库中获得待扩增基因序列，以此为依据可设计引物。该小组拟定的引物设计如表所示，其引物设计有一个是不科学的，请指出并说明原因 CaMV35S的引物设计不科学，原因是引物太短、特异性弱，并且两个引物之间会互补结合CaMV35S的引物设计不科学，原因是引物太短、特异性弱，并且两个引物之间会互补结合。
| 基因 | 引物序列 | 产物片段大小 | 基因来源 |
| Lectin | F-5'GCC CTC TAC TCC ACC CCC ATC C-3' R-5'GCC CAT CTG CAA GCC TTT TTG TG-3' |
118 | 内源基因 |
| CaMV35S | F-5'GGG ATT-3' R-5'AAT CCC-3' |
195 | 外源基因 |
| NOS | F-5'GAA TCC TGT TGC CGG TCT TG-3' R-5'TTA TCC TAG TTT GCG CGC TA-3' |
180 | 外源基因 |
| CP4-EPSPS | F-5'CTT CTG TGC TGT AGC CAC TGA TGC-3 R-5'CCA CTA TCC TTC GCA AGA CCC TTC-3 |
320 | 外源基因 |
②PCR扩增：在4个反应体系中分别加入
待测大豆基因组DNA
待测大豆基因组DNA
（模板）、相应引物、Taq
Taq
酶、4种脱氧核苷酸
4种脱氧核苷酸
等，并将PCR仪的温度设定为：变性94℃30s、复性58℃30s、延伸72℃40s,循环30次。“延伸”的温度设定为72℃，是因为该温度下 Taq酶活性较高
Taq酶活性较高
。在设定的PCR体系下可以特异性扩增目标DNA片段，主要是因为 引物与模板DNA的结合
引物与模板DNA的结合
具有特异性。（3）扩增产物检测：可采用
琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳
的方法检测。部分实验结果如图2、3所示。据图2初步判断，该大豆为 非转基因
非转基因
（填“转基因”或“非转基因”）大豆。据图2、图3分析，其实验结果是 不可信的
不可信的
（填“可信的”或“不可信的”）。【考点】DNA的粗提取与鉴定；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】溶解DNA；二苯胺；序列数据库；CaMV35S的引物设计不科学，原因是引物太短、特异性弱，并且两个引物之间会互补结合；待测大豆基因组DNA；Taq；4种脱氧核苷酸；Taq酶活性较高；引物与模板DNA的结合；琼脂糖凝胶电泳；非转基因；不可信的
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：48引用：1难度：0.5
