如图是利用工程菌（大肠杆菌）生产人生长激素的实验流程。所用的pBR322质粒含有限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个，且三种酶切割形成的末端各不相同，而AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，TetR表示四环素抗性基因。请回答以下相关问题：
（1）在目的基因的筛选与获取过程中，如图过程③的目的是 将平末端改造成黏性末端将平末端改造成黏性末端。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对图中质粒进行切割，形成的DNA片段种类最多有 99种。
（2）基因表达载体是载体的一种，除目的基因、启动子外，它还必须有 标记基因、终止子和复制原点标记基因、终止子和复制原点（答2点）等。启动子的作用是 RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNARNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA。
（3）如果只用限制酶PstⅠ切割目的基因和质粒，完成过程④、⑤后（受体大肠杆菌不含AmpR、TetR），⑤过程常用 Ca2+Ca2+处理大肠杆菌。将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取甲培养基上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图乙、丙所示。接种到甲培养基上的目的是筛选 含四环素抗性基因含四环素抗性基因的大肠杆菌；含有目的基因的大肠杆菌在培养基乙和丙上的生存情况是 在丙中能存活，在乙中不能存活在丙中能存活，在乙中不能存活。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】将平末端改造成黏性末端；9；标记基因、终止子和复制原点；RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA；Ca2+；含四环素抗性基因；在丙中能存活，在乙中不能存活
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：3引用：2难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
