如图为“乙肝基因工程疫苗”生产和使用过程图解，质粒上箭头所指部位为相应的限制性内切核酸酶的切割位点。质粒中 lacZ 基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal,使菌落显现出蓝色；若无该基因，菌落则成白色。请回答下列问题：
（1）构建基因表达载体时，双酶切与单酶切相比，其好处有防止 目的基因自身环化目的基因自身环化和防止 目的基因反向接入质粒目的基因反向接入质粒。
根据图示，该过程中获取目的基因最好使用的限制性内切核酸酶是 BamHⅠ和EcoRⅠBamHⅠ和EcoRⅠ。
（2）过程①需要的酶是 DNA连接酶DNA连接酶，过程②需要先将大肠杆菌用 Ca2+Ca2+处理，目的是 使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
（3）筛选转基因成功的大肠杆菌，需要在培养基中加入 青霉素青霉素和 X-galX-gal，如果出现 白色白色菌落，说明基因表达载体成功转入大肠杆菌。
（4）③过程需要经过 转录转录和 翻译翻译过程，其中在大肠杆菌核糖体上完成的过程是 翻译翻译。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】目的基因自身环化；目的基因反向接入质粒；BamHⅠ和EcoRⅠ；DNA连接酶；Ca2+；使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态；青霉素；X-gal；白色；转录；翻译；翻译
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：7引用：1难度：0.7
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
