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2019年7月13日,Inovio制药公司宣布,该公司的GT-EPIC平台基于DNA的个性化新生抗原靶向疫苗进行了第一位癌症患者治疗。GT-EPIC平台进行的DNA疫苗的研究是继病原体疫苗和亚单位疫苗之后的第三代疫苗。GT-EPIC平台的独特之处在于,他们没有创建或制造免疫抗原,将其植入人体,诱导所需的免疫反应,而是创造了一个DNA片段,它为一个或多个新生抗原编码,并将DNA放入身体的细胞中,允许自身的细胞产生所需的新抗原,激活机体的免疫系统,从而诱导特异性的体液免疫和细胞免疫应答。请回答下列问题:
(1)研制DNA疫苗时需要将抗原决定基因与质粒构建重组表达载体,目的是
使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用
使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用
;科研人员用如图所示的质粒为载体,应选用
BamHⅠ及DNA连接
BamHⅠ及DNA连接
酶将该质粒与抗原决定基因构建为重组质粒。检测抗原决定基因是否成功表达的方法是
抗原-抗体杂交
抗原-抗体杂交

(2)获取抗原决定基因时,通常是在肿瘤病变细胞内提取mRNA,通过逆转录酶的作用获取
cDNA
cDNA
用于PCR扩增,扩增时同时需要设计
种引物,原因是
DNA是两条反向平行的双链结构,DNA聚合酶只能从3’延伸子链,用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增
DNA是两条反向平行的双链结构,DNA聚合酶只能从3’延伸子链,用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增

(3)DNA疫苗所利用的DNA编码序列通常只是单一的一段病原体基因,而非整个基因组,这样做的优点是
比较安全,能够产生相应的抗原刺激免疫系统,又不会产生完整的病原体造成危害
比较安全,能够产生相应的抗原刺激免疫系统,又不会产生完整的病原体造成危害

【答案】使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用;BamHⅠ及DNA连接;抗原-抗体杂交;cDNA;两;DNA是两条反向平行的双链结构,DNA聚合酶只能从3’延伸子链,用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增;比较安全,能够产生相应的抗原刺激免疫系统,又不会产生完整的病原体造成危害
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:15引用:1难度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括
     
     

    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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