蛋白质提取、分离在分子生物学研究中具有重要意义。
(1)蛋白质提取和分离的步骤一般分为样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。
(2)提取血红蛋白时,选用猪血,而不选用鸡血。理由是哺乳动物红细胞中没有细胞核,减少干扰哺乳动物红细胞中没有细胞核,减少干扰。
(3)实验前采取新鲜的猪血,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,目的是防止血液凝固防止血液凝固。若要从红细胞中提取血红蛋白,则要对获得的红细胞进行洗涤洗涤、血红蛋白释放血红蛋白释放和分离血红蛋白溶液、透析,才能获得含杂质较少的血红蛋白溶液。
(4)通过凝胶色谱凝胶色谱法将样品进一步纯化,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法进行纯度鉴定。
(5)在凝胶色谱法制作过程中,装填凝胶柱时,不得有气泡存在,原因是气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。
【考点】蛋白质的结构和功能的综合.
【答案】样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定;哺乳动物红细胞中没有细胞核,减少干扰;防止血液凝固;洗涤;血红蛋白释放;凝胶色谱;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:208引用:4难度:0.6
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