请根据“血红蛋白的提取和分离”实验,回答下列问题:
(1)血红蛋白因含有 血红素血红素(该物质中含Fe2+)而呈红色,这有利于对提取过程进行监测。
(2)在进行样品处理时首先要使用 生理盐水生理盐水对红细胞进行洗涤。在该过程中,若 离心速度过高和时间过长离心速度过高和时间过长会使白细胞一同沉淀,达不到分离的效果。
(3)将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加入 蒸馏水和甲苯蒸馏水和甲苯使红细胞破裂,释放出血红蛋白,再通过离心的方法将血红蛋白从混合液中分离出来。
(4)将收集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析,透析的原理是 透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内。
(5)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化。装填色谱柱时不能有气泡存在,因为 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低分离效果。
(6)最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。加入 SDS可以使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率完全取决于 分子的大小分子的大小。
(7)本实验用的是交联葡聚糖凝胶(Sephadex G-75),其中“75”表示 凝胶得水值凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸收水分7.5g。
【考点】蛋白质的结构和功能的综合.
【答案】血红素;生理盐水;离心速度过高和时间过长;蒸馏水和甲苯;透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内;气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序;分子的大小;凝胶得水值
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:4引用:2难度:0.6