磷酸吡哆醛（PLP）是维生素B6的活性形式，是多种酶的重要辅酶。科研人员从大肠杆菌（E•coliK12）中找到了合成PLP的关键酶A，通过基因工程构建了高产PLP的工程菌，流程如图所示，IPTG可诱导lacI启动酶A基因表达。回答下列问题：
（1）在基因工程中，①过程得到的酶A基因称为 目的基因目的基因。PCR技术扩增酶A基因过程中，变性的目的是 使酶A基因DNA双链解为单链使酶A基因DNA双链解为单链。
（2）在构建pETDuet-1-A表达载体过程中，酶A基因与质粒在DNA连接酶的作用下通过 磷酸二酯磷酸二酯键连接起来。③过程常用Ca2+处理，并在一定温度下促进E•coliBL21吸收表达载体从而完成 转化转化过程。
（3）③过程后将工程菌先置于含 氨苄青霉素氨苄青霉素的培养基中筛选出能够生长的菌落，再做进一步筛选即可得到所需菌落。为验证④过程得到的是否为高产PLP工程菌，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：将原始E•coliBL21菌株与重组菌株分别在含有适量IPTG的培养液中适宜条件下培养，一段时间后分别检测培养液中PLP的含量将原始E•coliBL21菌株与重组菌株分别在含有适量IPTG的培养液中适宜条件下培养，一段时间后分别检测培养液中PLP的含量。
（4）研究表明，当IPTG浓度过高时，PLP产量反而下降，其原因可能是 IPTG浓度过高会抑制工程菌的生长IPTG浓度过高会抑制工程菌的生长。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】目的基因；使酶A基因DNA双链解为单链；磷酸二酯；转化；氨苄青霉素；将原始E•coliBL21菌株与重组菌株分别在含有适量IPTG的培养液中适宜条件下培养，一段时间后分别检测培养液中PLP的含量；IPTG浓度过高会抑制工程菌的生长
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/6/27 10:35:59组卷：1引用：2难度：0.6
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
