接种疫苗是控制新冠肺炎的重要措施之一，新冠病毒疫苗有多种，我国科学家团队研发的腺病毒载体重组新冠病毒疫苗（重组疫苗）是一种基因工程疫苗。如图是构建含新冠病毒S蛋白（抗原）基因的重组腺病毒表达载体的过程，箭头表示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位点（四种酶的识别序列详见下表）。请回答下列问题：
| 限制酶 | 识别序列和切制位点 |
| NcoⅠ | C↓CATGG |
| SphⅠ | CCATG↓C |
| NheⅠ | G↓GATCC |
| BamHⅠ | G↓CTAGC |
逆转录
逆转录
得到cDNA，再经PCR技术获取大量S蛋白基因，PCR技术的原理是 根据体内DNA复制原理进行体外DNA复制的多聚酶链式反应
根据体内DNA复制原理进行体外DNA复制的多聚酶链式反应
。（2）为使重组质粒构建过程顺利进行，需先使用限制酶
NcoⅠ
NcoⅠ
和 NheⅠ
NheⅠ
切割质粒，选用两种限制酶对新冠病毒的S蛋白基因和质粒进行切割的目的是 防止S蛋白基因自身环化；防止S蛋白基因与质粒反向连接；防止质粒自身环化
防止S蛋白基因自身环化；防止S蛋白基因与质粒反向连接；防止质粒自身环化
（答出1点即可）。（3）扩增含S蛋白基因的重组腺病毒：腺病毒为DNA病毒，对人体无害，需要利用技术手段将上面得到的重组质粒整合到
腺病毒DNA（基因组）
腺病毒DNA（基因组）
中，然后培养一种称之为293的细胞，让这种重组病毒侵染这些细胞，同时使用 抗原-抗体杂交
抗原-抗体杂交
方法检测有无S蛋白的产生，若有，则证明S蛋白基因成功表达，重组腺病毒可以用作疫苗。（4）人体接种腺病毒重组疫苗后，S蛋白基因经
转录和翻译
转录和翻译
表达出S蛋白抗原，诱导机体通过 体液
体液
免疫产生抗体。重组疫苗只需要注射一针即可完成接种。数周后接种者体内仍然能检测到重组腺病毒DA。请由此推测只需注射一针即可起到免疫保护作用的原因是 重组腺病毒DNA在人体细胞中持续表达抗原，反复刺激机体免疫系统
重组腺病毒DNA在人体细胞中持续表达抗原，反复刺激机体免疫系统
。（5）综合上述信息，重组腺病毒载体疫苗是安全的，判断的依据是
腺病毒载体疫苗是将新冠病毒的抗原基因插入至腺病毒这个载体中，使腺病毒表达出新冠病毒的抗原而不产生新冠病毒的毒性
腺病毒载体疫苗是将新冠病毒的抗原基因插入至腺病毒这个载体中，使腺病毒表达出新冠病毒的抗原而不产生新冠病毒的毒性
。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】逆转录；根据体内DNA复制原理进行体外DNA复制的多聚酶链式反应；NcoⅠ；NheⅠ；防止S蛋白基因自身环化；防止S蛋白基因与质粒反向连接；防止质粒自身环化；腺病毒DNA（基因组）；抗原-抗体杂交；转录和翻译；体液；重组腺病毒DNA在人体细胞中持续表达抗原，反复刺激机体免疫系统；腺病毒载体疫苗是将新冠病毒的抗原基因插入至腺病毒这个载体中，使腺病毒表达出新冠病毒的抗原而不产生新冠病毒的毒性
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：10引用：2难度：0.7
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