某科学实验室专门为城市农业培育了像葡萄一样的小番茄，这种小番茄也适合在太空种植。科学家利用基因突变将控制生长的终止基因（SP）改造为SP1基因，利用基因敲除（将同源DNA片段导入受体细胞，使同源DNA片段在原有位置替代了靶基因片段）的方法使小番茄的成熟期缩短为40天。如图为SP1基因两端的序列和质粒中相关的序列，已知限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC，限制酶II的识别序列和切点是-↓GATC。
回答下列问题：
（1）构建基因表达载体时，需使用 限制酶Ⅰ限制酶Ⅰ（填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”）切割质粒。目的基因的首端是启动子，启动子在基因中的作用是 RNA聚合酶识别和结合的部位RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA。
（2）利用SP1基因敲除SP基因属于生物变异中的 基因重组基因重组，敲除SP基因后的受体细胞需要经组织培养形成完整个体，其中再分化的实质是 基因的选择性表达基因的选择性表达。
（3）科研人员提取愈伤组织细胞的所有RNA后，先获得cDNA，再进行PCR扩增，但最终未能检测出SP1基因，其可能原因是 SP1基因未能导入受体细胞或导入受体细胞的SP1基因未能转录SP1基因未能导入受体细胞或导入受体细胞的SP1基因未能转录。在个体生物学水平上，SP基因成功表达的鉴定标准为 小番茄成熟期约为40天小番茄成熟期约为40天。
（4）转基因技术是一把双刃剑，引发人们在 食物食物安全、生物生物安全、环境环境安全三个方面发生激烈的争论。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制酶Ⅰ；RNA聚合酶识别和结合的部位；基因重组；基因的选择性表达；SP1基因未能导入受体细胞或导入受体细胞的SP1基因未能转录；小番茄成熟期约为40天；食物；生物；环境
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：1引用：2难度：0.7
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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