枸杞子是应用极为广泛的一种中药饮片,李时珍在《本草纲目》中把枸杞子的主要功效为“滋肾、润肺、明目”,又曰“久服,坚筋骨,轻身不老,耐寒暑”。我国对中药饮片中的微生物含量有明确规定,为调查某家药店在售枸杞子的耐热菌(100℃较短时间处理细菌中芽孢和孢子不会死亡)污染情况,进行如下实验:
步骤一:取枸杞子样品25g,加入适量的pH为7.0的氯化钠蛋白胨缓冲液获得样品溶液,用无菌纱布过滤制备成待测液250mL。
步骤二:对待测液进行 沸水浴(100℃加热处理)沸水浴(100℃加热处理)较短的一段时间。
步骤三:快速冷却后取待测液10mL以10倍梯度依次稀释4次,各取0.1mL溶液涂布接种于4个胰酪大豆胨平板上,培养72h。
步骤四:观察并进行计数。
回答问题:
(1)微生物计数的常用方法有 显微镜直接计数法(血细胞计数板计数法)显微镜直接计数法(血细胞计数板计数法)、稀释涂布平板法稀释涂布平板法,其中后者的测量值比实际值偏小,因为 当两个或两个以上细胞(细菌或真菌)连在一起时,培养基上观察到的只是一个菌落(培养基上有个别的菌落不是单个的菌落/不是单菌落/不是由一个细胞繁殖而来)当两个或两个以上细胞(细菌或真菌)连在一起时,培养基上观察到的只是一个菌落(培养基上有个别的菌落不是单个的菌落/不是单菌落/不是由一个细胞繁殖而来)。
(2)将步骤二补充完整:沸水浴(100℃加热处理)沸水浴(100℃加热处理)。
(3)步骤三所用的培养基通常是在液体培养基中加入适量的 琼脂琼脂,并需对培养基进行灭菌。步骤三需同时设置 空白平板(接种等量无菌水的平板)空白平板(接种等量无菌水的平板)在相同条件下培养作为对照。
(4)计数微生物时稀释倍数必须是适宜的,要保证能获得菌落数为 30~30030~300之间的平板,因为这种情况下计数相对准确一些。
(5)已知4个平板上的菌落数分别为85、80、26、75个,则样品所含耐热菌数为 8×1078×107(个/g)。
【答案】沸水浴(100℃加热处理);显微镜直接计数法(血细胞计数板计数法);稀释涂布平板法;当两个或两个以上细胞(细菌或真菌)连在一起时,培养基上观察到的只是一个菌落(培养基上有个别的菌落不是单个的菌落/不是单菌落/不是由一个细胞繁殖而来);沸水浴(100℃加热处理);琼脂;空白平板(接种等量无菌水的平板);30~300;8×107
【解答】
【点评】
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