药物敏感试验简称药敏试验，旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感程度，以指导临床合理选用抗生素。纸片扩散法（Kirby-Bauer test）是药敏试验一种常用的方法，它将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后便不断向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌生长被抑制，形成透明的抑菌圈。
（平板的制备）
（1）关于药敏试验所用的琼脂平板制备过程，正确的顺序是

C

C

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A．称量、溶解、定容、调pH、倒平板、灭菌
B．称量、溶解、调pH、定容、倒平板、灭菌
C．称量、溶解、定容、调pH、灭菌、倒平板
D．称量、溶解、调pH、定容、灭菌、倒平板
（2）培养基的灭菌条件应该设定为

100KPa,121℃，15～30min

100KPa,121℃，15～30min

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（测试菌接种）
（3）若使用纸片扩散法进行药敏试验，在平板制备及测试菌接种环节，无需使用的工具是图1中的

D

D

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（抑菌圈观察）
某研究小组将含有相同浓度抗生素Ⅰ～Ⅳ的四个纸片分别贴放在生长有测试菌的琼脂平板上，在合适的温度条件下孵育16h,结果如图2所示：
（4）MIC是药敏试验中评价抗生素药效的常用指标，其定义为某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。根据上图的试验结果可知，对于该试验所用测试菌而言，抗生素Ⅰ的MIC

大于

大于

（选填“大于”“小于”或“等于”）抗生素Ⅲ的MIC。
（5）在相关试验操作均严谨规范的情况下，在含有抗生素IV的纸片周围出现了较大的抑菌圈，抑菌圈中存在有若干个测试菌的菌落。试对上述现象的成因作出分析：

抗生素Ⅳ对于野生型测试菌具有较强的抑制作用，但测试菌中已经出现能抵抗抗生素Ⅳ的抗性突变株

抗生素Ⅳ对于野生型测试菌具有较强的抑制作用，但测试菌中已经出现能抵抗抗生素Ⅳ的抗性突变株

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