基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。请回答下列问题：
（1）若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是鸟嘌呤脱氧核苷酸和腺嘌呤脱氧核苷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸和腺嘌呤脱氧核苷酸之间相连的化学键。
（2）图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是BDBD。
A．若图中的ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子
B．DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处，解旋酶作用于①处
C．若只用这个片段中的3个碱基对，排列出的DNA片段有64种
D．就游离的磷酸基而言，该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基
（3）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取B和CB和C作为引物（DNA复制子链的延伸方向5′→3′）。该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生等长的目的基因片段88个。
（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是PstⅠ、EcoRⅠPstⅠ、EcoRⅠ。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有11种。
（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含抗四环素基因抗四环素基因基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是各种生物共用一套密码子各种生物共用一套密码子。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】鸟嘌呤脱氧核苷酸和腺嘌呤脱氧核苷酸；BD；B和C；8；PstⅠ、EcoRⅠ；1；抗四环素基因；各种生物共用一套密码子
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：130引用：6难度：0.3
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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