某研究所以马尾藻岩藻聚糖（SF）为研究对象，体外培养小鼠肉瘤细胞S180，做抗肿瘤活性实验的研究。下列为部分实验步骤与结果。
实验步骤：
①将S180肿瘤细胞以RPMI1640为营养液，在5%CO2培养箱中培养。
②将上述培养过的S180肿瘤细胞经酶消化，按1×103～1×105个•mL-1接种到96孔培养板，适宜条件下培养24h、48h、72h、96h后，以MTT法（又称比色法，一种检测细胞存活和生长的方法）于波长490nm处测定OD值，结果如图1。
③在适宜的培养条件和恰当的S180肿瘤细胞接种浓度下，研究不同浓度（0 mg•mL-1、0.1 mg•mL-1、0.5 mg•mL-1、1 mg•mL-1、2 mg•mL-1、4 mg•mL-1、8 mg•mL-1、10 mg•mL-1、15 mg•mL-1、20 mg•mL-1、25 mg•mL-1、30 mg•mL-1）的SF对S180肿瘤细胞增殖的抑制情况，96h后以MTT法于波长490nm处测定OD值，结果如图2。
请回答下列问题：
（1）步骤①中以RPMI1640为培养液培养S180肿瘤细胞的原理是 细胞增殖细胞增殖。培养液中除细胞所需的营养物质之外，通常还添加一定量的 抗生素抗生素，以防培养过程中的污染。
（2）步骤②中“消化”所使用的酶是 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶），为减少OD值测定的误差，应注意 多测量，取平均值多测量，取平均值。
（3）已知在一定细胞数目范围内，MTT法测得的OD值与活细胞数量呈正相关，由图1可知步骤③中恰当的S180肿瘤细胞接种浓度为 5×1035×103个•mL-1。
（4）图2实验结果表明，在一定范围内SF浓度与细胞增殖的抑制作用呈 正相关正相关（填“正相关”或“负相关”），当SF浓度达到 2525mg•mL-1时细胞增殖的抑制作用达到极限，继续增加SF浓度对细胞增殖的抑制作用变化不明显。
【考点】动物细胞培养的条件与过程；细胞的癌变的原因及特征．
【答案】细胞增殖；抗生素；胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）；多测量，取平均值；5×103；正相关；25
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：23引用：1难度：0.6
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1．动物细胞培养和植物组织培养是细胞工程的基本技术，下列关于这两项技术的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 1:30:1组卷：29引用：2难度：0.7 -
2．回答与基因工程、动物克隆和胚胎工程有关的问题：
（1）几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。在进行基因工程操作时，可以从植物体中提取几丁质酶的mRNA，以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是。若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。
（2）为了提高动物成纤维细胞克隆形成率，可以选择适宜的培养基、添加牛血清、以支持生长等措施。当第一个卡氏瓶中的细胞浓度不再增加时，若要细胞继续增殖，可采用的方法是。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO2浓度，CO2的作用是。
（3）下列关于胚胎工程的叙述，错误的是
A．在动物的饲料中添加一定量的促性腺激素促使超数排卵
B．若在囊胚期进行胚胎分割，内细胞团均等分割，滋养成则不必
C．可以从雌性动物体内卵泡处吸取卵泡液，取出卵母细胞进一步培养成熟
D．胚胎成纤维细胞可以用于胚胎干细胞的培养，因为其能分泌抑制细胞分化的物质。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：4引用：1难度：0.7 -
3．据国际糖尿病联盟最新数据，2021年全球约5.37亿成人患有糖尿病，670万成人因糖尿病或其并发症死亡。如图是研究人员提出的治疗方案，请回答下列问题：
（1）从患者体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为。一般来说，动物细胞培养需要的条件有（少答出两点）。
（2）利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是。目前临床用的胰岛素生效较慢，科学家将胰岛素β链的第28和29个氨基酸调换顺序，成功获得了速效胰岛素。生产速效胰岛素，需要对进行定向改造。
A.胰岛素
B.胰岛素mRNA
C.胰岛素基因
D.胰岛
（3）欲检测胰岛类似细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能，可设计如下实验：将等量的胰岛类似细胞与正常胰岛B细胞分别加入两组相等浓度的培养液中，适宜且相同条件下进行培养，一段时间后分别检测两组培养液中。
（4）该治疗糖尿病的方法与异体移植相比，突出的优点是。发布：2024/12/31 2:30:2组卷：35引用：2难度：0.6
