如图是A基因的部分片段和载体的部分结构，科研人员欲将A基因的启动子连接在图中载体中，进而使载体上的荧光蛋白基因得到表达。图中标记了A基因部分片段和载体部分结构中的限制酶切位点及各种限制酶识别序列及切割位点，回答下列问题：
（1）启动子是 RNA聚合概识别和结合RNA聚合概识别和结合的部位。图中R、F表示扩增启动子所用的 引物引物。
（2）已知A基因的启动子两端没有限制酶识别序列，因此可在F和R的 5'5'（填“3'”或“5'”）端分别
连接 SolI、EcoRISolI、EcoRI酶的识别序列，这两种酶的识别序列添加位点 不能不能（填“能”或“不能”）交换。
（3）为完成科研人员的设想，除需使用F与R处添加的序列所对应的酶外，扩增启动子和构建基因表达载体的过程还需用到的酶有 MunI、XhoI、TaqDNA聚合酶（耐高温的DNA聚合酶）、DNA连接酶MunI、XhoI、TaqDNA聚合酶（耐高温的DNA聚合酶）、DNA连接酶。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】RNA聚合概识别和结合；引物；5'；SolI、EcoRI；不能；MunI、XhoI、TaqDNA聚合酶（耐高温的DNA聚合酶）、DNA连接酶
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/28 8:51:19组卷：2引用：1难度：0.6
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发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
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