2020年中国政府提出“努力争取2060年前实现碳中和”的目标。发展利用生物能源是实现碳中和的有效途径。紫苏种子含大量油脂,出油率达35%~64%,三酰甘油(TAG)是紫苏种子主要储藏脂类,DGAT1是TAG合成的关键酶。科研人员将紫苏DGAT1基因导入微藻中,培养高产生物柴油的工程藻,如图所示。

回答下列问题。
(1)从紫苏组织细胞中提取总RNA时,需要加入RNA酶抑制剂,目的是 防止RNA酶降解RNA防止RNA酶降解RNA。将RNA逆转录合成的cDNA作模板,PCR扩增DGAT1基因,反应体系中需加入 耐高温的DNA聚合(或Taq DNA聚合)耐高温的DNA聚合(或Taq DNA聚合)酶,其作用是 将游离的脱氧核苷酸连接到引物3’端,合成DNA子链将游离的脱氧核苷酸连接到引物3’端,合成DNA子链。为使DGAT1基因两端分别添加BamHI和HindⅢ识别序列,可将相应序列分别添加在两种引物的 5′5′(填“5'”或“3'”)端。
(2)构建DGAT1基因表达载体的目的是 让目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代让目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,并且使DGAT1基因能够表达并发挥作用。若只考虑DNA片段的两两连接,构建表达载体时可得到 33种大小不同的连接产物。利用 琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳方法将不同大小的DNA片段和连接产物分离,再将基因表达载体分离纯化导入微藻细胞。
(3)若鉴定微藻基因组中整合有DGAT1基因,不能不能(填“能”或“不能”)说明高产油工程藻已生产成功。理由是 DGAT1基因在微藻细胞中不一定成功表达(或微藻细胞不一定产生TAG、微藻细胞出油率可能不高等)DGAT1基因在微藻细胞中不一定成功表达(或微藻细胞不一定产生TAG、微藻细胞出油率可能不高等)(答出1点即可)。“碳中和”含义是通过计算二氧化碳的排放总量,然后通过植树等方式把这些排放量吸收掉。与使用石油等化石燃料相比,生产利用产油工程藻的“生物柴油”有利于实现碳中和,原因是 使用化石燃料只会排放CO2,利用产油工程藻生产“生物柴油”需要吸收CO2为原料使用化石燃料只会排放CO2,利用产油工程藻生产“生物柴油”需要吸收CO2为原料。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】防止RNA酶降解RNA;耐高温的DNA聚合(或Taq DNA聚合);将游离的脱氧核苷酸连接到引物3’端,合成DNA子链;5′;让目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代;3;琼脂糖凝胶电泳;不能;DGAT1基因在微藻细胞中不一定成功表达(或微藻细胞不一定产生TAG、微藻细胞出油率可能不高等);使用化石燃料只会排放CO2,利用产油工程藻生产“生物柴油”需要吸收CO2为原料
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:18引用:1难度:0.6
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