T-DNA插人失活技术是目前使用最为广泛的植物基因敲除手段，该技术利用农杆菌T-DNA介导转化，将一段带有报告基因的DNA序列整合到植物基因组DNA上，如果这段DNA插入到靶基因（待敲除基因）内部，就会使靶基因失活。回答下列问题。
（1）使用T-DNA介导转化的原因是 T-DNA能转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上T-DNA能转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。报告基因的作用是 检测DNA序列是否插入到靶基因中检测DNA序列是否插入到靶基因中。
（2）T-DNA在植物基因组中会发生随机整合，可利用PCR技术进行鉴定。某二倍体纯合植物A的某靶基因长度为900bp,利用T-DNA插入失活技术处理A植株获得该配基因的两种突变体B、C。现将依据靶基因的两端序列分别设计的引物1和引物2以及依据插入片段某端设计的引物3均加入PCR反应体系，对A、B、C三种植株的靶基因进行扩增，电泳结果如图所示。
①引物的作用是 使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸；依据靶基因序列设计的两种引物之间不能碱基互补配对，原因是 防止引物之间结合形成双链，降低引物与DNA模板链结合的效率防止引物之间结合形成双链，降低引物与DNA模板链结合的效率。
②根据电泳结果分析，突变株B、C中DNA序列插入的位置 相同相同（填“相同“或“不同“）；突变株C出现该结果的原因是 靶基因均被敲除掉靶基因均被敲除掉。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】T-DNA能转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上；检测DNA序列是否插入到靶基因中；使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸；防止引物之间结合形成双链，降低引物与DNA模板链结合的效率；相同；靶基因均被敲除掉
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：7引用：1难度：0.6
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1．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
2．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：3引用：3难度：0.7
