浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现，一种植物激素--油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因（如P450基因和红霉素抗性基因）的表达和酶活性都得到提高，在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质，有的则被直接排出体外。某课题进行了如图的操作，请回答下列问题：
（1）获得油菜素内酯合成酶基因的方法 从基因文库中获取、人工合成的目的基因、利用PCR技术扩增从基因文库中获取、人工合成的目的基因、利用PCR技术扩增（至少答出两种）。步骤①用PCR技术扩增基因的前提是 要有一段已知目的基因的核苷酸序列要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成 引物引物；步骤②用到的酶有 限制酶和DNA连接酶限制酶和DNA连接酶。
（2）图中导入重组质粒的方法是 感受态细胞转化法感受态细胞转化法，在导入之前应用一定浓度的 氯化钙溶液氯化钙溶液处理受体细菌。
（3）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，在含有 目的基因的DNA片段上目的基因的DNA片段上用放射性同位素标记制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入 红霉素红霉素可将含有目的基因的细胞筛选出来。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】从基因文库中获取、人工合成的目的基因、利用PCR技术扩增；要有一段已知目的基因的核苷酸序列；引物；限制酶和DNA连接酶；感受态细胞转化法；氯化钙溶液；目的基因的DNA片段上；红霉素
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：2引用：3难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
