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有研究表明,肥胖者的脂肪细胞中某基因(miR)的表达异常活跃。旨在研究miR的表达对人脂肪细胞的影响,根据以下实验材料完成实验思路,并预测实验结果及分析。
实验材料:培养瓶若干,细胞培养液,脂肪前体细胞悬液、成熟脂肪细胞悬液,抑制剂P(抑制miR的表达),TUNEL检测试剂盒(检测细胞凋亡情况),流式细胞测定仪(检测细胞周期分布),血细胞计数板,显微镜等。
(要求和说明:不考虑加入抑制剂P后体积变化等误差。细胞只进行原代培养且培养条件适宜。成熟脂肪细胞不具分裂能力。各种仪器操作和指标检测均不作具体要求)
(1)完善实验思路:
①取培养瓶并各加入等量适量的细胞培养液,分组处理如下,每组设置若干个重复样品。
A组:+脂肪前体细胞悬液;
B组:+脂肪前体细胞悬液+抑制剂P;C组:+成熟脂肪细胞悬液
B组:+脂肪前体细胞悬液+抑制剂P;C组:+成熟脂肪细胞悬液
;D组:+成熟脂肪细胞悬液+抑制剂P。
②各组样品在相同且适宜的条件下培养一段时间后,用TUNEL检测试剂盒检测成熟脂肪细胞凋亡情况,
借助显微镜用血细胞计数板检测脂肪前体细胞的数目
借助显微镜用血细胞计数板检测脂肪前体细胞的数目
,用流式细胞测定仪脂肪前体细胞的细胞周期分布;
③重复②若干次;
④对所得数据进行统计并分析。
(2)预测实验结果:图1为实验中A、B组某次测定的结果。请在图2坐标系中绘制成熟脂肪细胞数量变化曲线示意图(N0表示原始数量)。

(3)分析与讨论:
①实验结果表明,抑制剂P主要阻滞脂肪前体细胞分裂周期的
G1
G1
期,从而抑制细胞增殖。另外,抑制剂P还能显著提高成熟脂肪细胞的凋亡率。
②接种细胞时,脂肪前体细胞接种的原始数量要比N0
(填“多”或“少”)一些,其原因是
需检测脂肪前体细胞增殖,(而成熟脂肪细胞只凋亡)
需检测脂肪前体细胞增殖,(而成熟脂肪细胞只凋亡)
。在实验期间,若每天使用比浊计A组和B组培养瓶中的浑浊度并进行比较分析,其结果是
A组和B组浑浊度均逐渐增大,且A组大于B组
A组和B组浑浊度均逐渐增大,且A组大于B组

③综上分析,miR的活跃表达对脂肪细胞起到
促进分裂,减缓(/抑制)调亡
促进分裂,减缓(/抑制)调亡
作用,导致肥胖。

【考点】细胞死亡
【答案】B组:+脂肪前体细胞悬液+抑制剂P;C组:+成熟脂肪细胞悬液;借助显微镜用血细胞计数板检测脂肪前体细胞的数目;G1;少;需检测脂肪前体细胞增殖,(而成熟脂肪细胞只凋亡);A组和B组浑浊度均逐渐增大,且A组大于B组;促进分裂,减缓(/抑制)调亡
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:10引用:1难度:0.6
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