蝉花是我国的一种传统中药材，是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体，在其胞内含虫草多糖、甘露醇、虫草素及必需氨基酸等，这些物质通常作为保健品以及部分医用药品的成分。为了提高产量，研究人员尝试从天然蝉花中分离纯化出蝉拟青霉菌株进行人工培养，请回答以下问题：
（1）制备培养基
①该实验选择马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA），配制培养基的一般步骤：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板，倒平板后要将平板倒置，其主要目的是防止培养基中水分过快地挥发，防止冷凝的水珠落到培养基上，造成污染防止培养基中水分过快地挥发，防止冷凝的水珠落到培养基上，造成污染。
②为了便于筛选蝉拟青霉菌株，培养基中还应加入链霉素以抑制细菌细菌的生长，按功能划分，该培养基属于选择选择培养基。
（2）蝉花真菌的分离、纯化
①取新鲜蝉花，用75%乙醇进行消毒，取胸腔中菌体少许接种至PDA培养基，然后置于恒温培养箱恒温培养箱中25℃培养3～5d,平板上会形成菌落，研究人员可以根据菌落的特征对蝉花菌种进行鉴定，主要依据是不同菌形成菌落的形状、大小、隆起程度、颜色等一般不同不同菌形成菌落的形状、大小、隆起程度、颜色等一般不同。
②待菌落长至0.2～0.5cm时挑选少量菌丝进行纯化，纯化的方法有平板划线法和稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法，纯化2-4次确定无杂菌后，最后采用甘油管藏法甘油管藏法的方法进行长期保存。
（3）发酵生产
发酵生产中常用液体培养基，为检测蝉花真菌发酵液灭菌是否彻底的常用方法是取少量发酵液涂布到牛肉膏蛋白胨固体培养基上，适宜温度下培养一段时间，观察有无菌落产生取少量发酵液涂布到牛肉膏蛋白胨固体培养基上，适宜温度下培养一段时间，观察有无菌落产生。
【答案】计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板；防止培养基中水分过快地挥发，防止冷凝的水珠落到培养基上，造成污染；细菌；选择；恒温培养箱；不同菌形成菌落的形状、大小、隆起程度、颜色等一般不同；平板划线法和稀释涂布平板法；甘油管藏法；取少量发酵液涂布到牛肉膏蛋白胨固体培养基上，适宜温度下培养一段时间，观察有无菌落产生
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：18引用：1难度：0.7
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