“采菊东篱下，悠然见南山”，菊花是中国十大名花之一，为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C，拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。请回答相关问题：

（1）研究者从其他植物中克隆出花色基因时，采用了PCR技术扩增，扩增过程需要花色基因C、两对引物之外，还需要

（4种）脱氧核苷酸

（4种）脱氧核苷酸

、

耐高温的DNA聚合酶（或TaqDNA聚合酶）

耐高温的DNA聚合酶（或TaqDNA聚合酶）

。PCR 反应中的每次循环可分为变性、复性、

延伸

延伸

三步，其中复性是指：当温度下降到50℃左右时，

两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合（两种引物与单链相应互补序列结合）

两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合（两种引物与单链相应互补序列结合）

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（2）图1是花色基因C两侧被EcoRⅠ酶切后所形成的末端结构，请写出EcoRⅠ酶识别序列并标出切点：

。
（3）为防止目的基因C的自身环化和任意连接，有同学认为可以用EcoRⅠ和BamHⅠ两种酶切割含C基因的DNA分子和图中质粒，有同学认为不妥，理由是

花色基因C两侧没有HamHⅠ的识别序列，不能被BamHⅠ酶切；质粒被EcoRⅠ和BamHⅠ两种酶切后不能使目的基因连接在启动子和终止子之间

花色基因C两侧没有HamHⅠ的识别序列，不能被BamHⅠ酶切；质粒被EcoRⅠ和BamHⅠ两种酶切后不能使目的基因连接在启动子和终止子之间

（答出两点理由）。
（4）最后需要将重组质粒导入菊花细胞，研究者农杆菌转化法，这是利用了农杆菌中的Ti质粒的T-DNA的特性：

可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体DNA上

可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体DNA上

。若导入的是菊花体细胞，还需要通过

植物组织培养

植物组织培养

才能得到菊花植株。
（5）在个体生物学水平上，如何鉴定转基因菊花培育是否成功？

观察转基因菊花是否表现出基因C所控制的花色

观察转基因菊花是否表现出基因C所控制的花色

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