基因工程乙肝疫苗是乙肝表面抗原（HBsAg）亚单位疫苗，制作过程是采用现代生物技术将乙肝病毒表达表面抗原的基因进行质粒构建，将其导入CHO细胞（中国仓鼠卵巢细胞）中，通过培养这种CHO细胞来表达乙肝表面抗原亚单位，从而获得疫苗，基本流程如图1所示。请回答下列问题。
（1）要获取HBsAg基因，除图中方法外，还可以根据表面抗原蛋白质的结构推测氨基酸序列氨基酸序列，进而推测目的基因的脱氧核苷酸序列，再进行人工合成。
（2）图中①过程选用的限制酶是HindⅢ和XhoⅠHindⅢ和XhoⅠ，理由是HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位点，但限制酶SamⅠ的切割位点位于目的基因上，若选用限制酶SmaⅠ则会破坏目的基因HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位点，但限制酶SamⅠ的切割位点位于目的基因上，若选用限制酶SmaⅠ则会破坏目的基因。
（3）利用PCR技术扩增HBsAg基因片段的前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。图2是某同学设计的一组引物（只标注了部分碱基序列）：
该组引物是否合理否否，理由是引物Ⅱ自身折叠后会出现局部碱基互补配对，这影响了与模板的碱基互补配对引物Ⅱ自身折叠后会出现局部碱基互补配对，这影响了与模板的碱基互补配对。
（4）若一个HBsAg基因通过PCR扩增了4次，在子代基因中同时含有两个引物的基因占7878。
（5）HBsAg基因在CHO细胞中表达需要有特异性的启动子启动子，控制基因表达的起始时间和表达程度。HBsAg基因能否在CHO细胞中稳定遗传的关键是CHO细胞的DNA上是否插入了HBsAg基因CHO细胞的DNA上是否插入了HBsAg基因。
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【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】氨基酸序列；HindⅢ和XhoⅠ；HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位点，但限制酶SamⅠ的切割位点位于目的基因上，若选用限制酶SmaⅠ则会破坏目的基因；要有一段已知目的基因的核苷酸序列；否；引物Ⅱ自身折叠后会出现局部碱基互补配对，这影响了与模板的碱基互补配对；；启动子；CHO细胞的DNA上是否插入了HBsAg基因
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【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：22引用：1难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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