研究表明，转基因抗虫玉米中的BT基因能表达一种毒蛋白，这种毒蛋白能有效杀死玉米瞑（一种农业害虫）。请回答下列问题：
（1）BT基因在基因工程中称为 目的基因目的基因。在基因表达载体中，除了要有BT基因外，还必须有复制原点、启动子、终止子和 标记基因标记基因。若将BT基因插入到Ti质粒的 T-DNAT-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使其导入玉米细胞并将其插入到玉米细胞中的染色体上。
（2）在利用PCR技术扩增BT基因时，需要提供模板、原料、引物、热稳定DNA聚合酶/Taq酶热稳定DNA聚合酶/Taq酶等条件，将模板DNA加热至90-95℃的目的是 使BT基因（受热后）解开为单链使BT基因（受热后）解开为单链。
（3）BT基因与载体结合过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶。若某限制酶的识别序列和切点是
请画出目的基因被限制酶切割后所形成的黏性末端 
。DNA连接酶对所连接的两端碱基序列 没有没有（填“有“或“没有”）专一性要求。检测BT基因的表达产物可采用 抗原—抗体杂交抗原—抗体杂交技术。
（4）为了防止抗虫玉米通过花粉传播带来的生态学问题，科研小组考虑将抗虫基因导入到玉米细胞的 线粒体或叶绿体线粒体或叶绿体中以防止基因污染。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】目的基因；标记基因；T-DNA；热稳定DNA聚合酶/Taq酶；使BT基因（受热后）解开为单链；；没有；抗原—抗体杂交；线粒体或叶绿体
；没有；抗原—抗体杂交；线粒体或叶绿体【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：1引用：1难度：0.6
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发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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