法尼醇X受体（FXR）又称胆汁酸受体，研究表明，FXR在调节肝脏再生和抑制肝脏肿瘤方面发挥了关键作用。斑马鱼具有与人类高度相似的基因组，其胚胎和幼鱼身体透明，在毒理学和药理学研究方面有其独特优势。研究人员建立模型动物，用于FXR相关药物筛选，请回答下列问题：
（1）已知XhoⅠ酶识别的序列具有回文对称的特点（即一条链从左向右读和另一条链从右向左读的序列是相同的），若一段核苷酸序列为“-ATCTCGACCGGG-”，则对该段核苷酸序列进行剪切的XhoⅠ酶识别的核苷酸序列（6个核苷酸）为 —CTCGAG——CTCGAG—；限制酶破坏的键为 磷酸二酯键磷酸二酯键。
（2）图为NR1H4基因的两种引物序列，要将XhoⅠ酶和BamHⅠ酶的酶切位点添加到NR1H4基因两端，加入限制酶酶切位点的位置应在图中的 ①③①③（填序号）处；进行PCR扩增，经过 33轮循环后，可得到两端带酶切位点的目的基因片段。
（3）将重组质粒导入用 Ca2+Ca2+处理过的大肠杆菌体内，扩大培养后，提取质粒。再将重组质粒借助 显微注射仪显微注射仪（填仪器名称）注入斑马鱼 受精卵受精卵细胞内。
（4）在重组质粒上，含有氨苄青霉素抗性基因和增强绿色荧光蛋白基因。在斑马鱼培养过程中，应以 增强绿色荧光蛋白基因增强绿色荧光蛋白基因作为标记基因筛选出肝脏中特异性表达的个体；斑马鱼在此实验中作为模型动物方便进行筛选，原因是 斑马鱼胚胎和幼鱼身体透明，可直接观察肝脏的荧光斑马鱼胚胎和幼鱼身体透明，可直接观察肝脏的荧光。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】—CTCGAG—；磷酸二酯键；①③；3；Ca2+；显微注射仪；受精卵；增强绿色荧光蛋白基因；斑马鱼胚胎和幼鱼身体透明，可直接观察肝脏的荧光
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：0引用：1难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
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