2020年诺贝尔化学奖授予“CRISPR/Cas9基因编辑技术”的发明者，以表彰他们在基因组编辑领域的贡献。CRISPR/Cas9基因编辑技术能对基因进行定点编辑，其原理是由一条单链向导RNA（sgRNA）引导内切核酸酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割（如图）。回答下列问题：
（1）CRISPR复合体中的sgRNA的主要功能是与目的基因上的 特定碱基序列（核苷酸序列）特定碱基序列（核苷酸序列）互补从而 特定位点切割DNA特定位点切割DNA。Cas9蛋白化断裂的化学键是 磷酸二酯键磷酸二酯键。若采用基因工程的方法获得Cas9蛋白，构建重组质粒需要的酶是 限制性内切核酸酶和DNA连接酶限制性内切核酸酶和DNA连接酶。
（2）一般来说，在使用CRISPR/Cas9基因编辑系统对不同基因进行编辑时，应使用Cas9和 不同不同（填“相同”或“不同”）的sgRNA进行基因的相关编辑。
（3）若将CRISPR/Cas9基因编辑技术培育转基因生物，与传统的基因工程相比，其明显优点是 避免了因目的基因随机插入宿主细胞DNA引起的生物安全性问题避免了因目的基因随机插入宿主细胞DNA引起的生物安全性问题。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】特定碱基序列（核苷酸序列）；特定位点切割DNA；磷酸二酯键；限制性内切核酸酶和DNA连接酶；不同；避免了因目的基因随机插入宿主细胞DNA引起的生物安全性问题
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：6引用：1难度：0.7
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
