苏云金芽孢杆菌存在一种抗虫基因（Bt毒蛋白基因），科学家培育出了转Bt毒蛋白基因抗虫棉。已知Bt基因的两端存在EcoRⅠ、BamHⅠ酶切位点，如图甲所示，质粒表达载体如图乙所示，ampR为青霉素抗性基因，tetR为四环素抗性基因，P为启动子，箭头表示酶切位点。请回答下列问题：
（1）与棉细胞相比，苏云金芽孢杆菌在结构上的显著特点是没有以核膜为界限的细胞核没有以核膜为界限的细胞核。Bt基因片段和质粒表达载体分别含有2、02、0个游离的磷酸基团。
（2）如果只用EcoRⅠ酶分别在甲、乙图示位点切割，加入DNA连接酶后，能能（填“能”或“不能”）得到重组质粒。如果采用EcoRⅠ和BamHⅠ两种酶进行切割，与单酶切相比，其优点在于可以防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接（或使目的基因与质粒表达载体结合的机会增加）可以防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接（或使目的基因与质粒表达载体结合的机会增加）。
（3）用合适的方法进行酶切后将酶切产物进行连接，再将连接产物分别导入去质粒受体菌中并繁殖成若干单菌落。从某个单菌落（标记为M）中取出一部分用含有四环素的培养基（标记为m1）培养，一部分用含有青霉素的培养基（标记为m2）培养。一段时间后，如果在m1中的受体菌存活（有菌落），在m2中的受体菌死亡（无菌落）在m1中的受体菌存活（有菌落），在m2中的受体菌死亡（无菌落），即可从该单菌落M中分离得到重组质粒。
（4）将重组质粒导入普通棉细胞中，利用植物组织培养植物组织培养（技术）可得到转基因植株。能说明转基因抗虫棉培育成功的简便方法是让虫吃该植株的叶片，如果虫死亡，则说明抗虫棉培育成功让虫吃该植株的叶片，如果虫死亡，则说明抗虫棉培育成功。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】没有以核膜为界限的细胞核；2、0；能；可以防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接（或使目的基因与质粒表达载体结合的机会增加）；在m1中的受体菌存活（有菌落），在m2中的受体菌死亡（无菌落）；植物组织培养；让虫吃该植株的叶片，如果虫死亡，则说明抗虫棉培育成功
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：28引用：1难度：0.7
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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