为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。
（1）将草甘膦抗性基因作为目的基因目的基因，与Ti质粒用相同的限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶和DNA连接酶处理构建基因表达载体。
（2）用CaCl2CaCl2处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加潮霉素潮霉素的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。
（3）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5'---ATGGCT………AGGAAC---3'
3'---TACCGA………TCCTTG---5'
根据上述序列应选择引物BDBD（填字母）进行PCR。
A．引物：5'-TACCGA-3'
B．引物：5'-GTTCCT-3'
C．引物：5'-AUGGCU-3'
D．引物：5'-ATGGCT-3'
（4）PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计22种引物，其原因是防止基因的两条反向平行的链都做模板，其碱基序列不同防止基因的两条反向平行的链都做模板，其碱基序列不同。
（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否表达表达。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的再分化再分化过程，获得转基因水稻。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】目的基因；限制性核酸内切酶；CaCl2；潮霉素；BD；2；防止基因的两条反向平行的链都做模板，其碱基序列不同；表达；再分化
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：39引用：4难度：0.6
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