利用微生物分解废纸是一种环保的方式，但废纸中的纤维素分子量大，不能直接进入酵母菌，且酵母菌无法分解利用环境中的纤维素。为解决这一难题，科学家将纤维素酶基因通过重组质粒导入酵母菌。其所用质粒及其酶切位点如图 1，外源 DNA 上纤维素酶基因及其酶切位点如图 2。
（1）为使纤维素酶基因能够与质粒有效组合，应选用最合适的限制酶是 BB。选该项而不选择其他选项的原因是 纤维素酶基因中存在BamHⅠ的酶切位点，因此不能选择BamHⅠ切割目的基因；只使用PstⅠ切割目的基因和质粒，可能出现目的基因或质粒的自身连接，因此为使纤维素酶基因能够与质粒有效组合，应选用最合适的限制酶是HindⅢ和PstⅠ纤维素酶基因中存在BamHⅠ的酶切位点，因此不能选择BamHⅠ切割目的基因；只使用PstⅠ切割目的基因和质粒，可能出现目的基因或质粒的自身连接，因此为使纤维素酶基因能够与质粒有效组合，应选用最合适的限制酶是HindⅢ和PstⅠ。
A.BamHⅠ和 PstⅠB.HindⅢ和 PstⅠC.PstⅠD.BamHⅠ和 HindⅢ
（2）科学家进一步构建了含 3 种不同基因片段的重组质粒，进行了一系列的研究。如图 3 是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。图 3 中已导入重组质粒的菌株有 菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。
（3）设置菌株Ⅰ作为对照，是为了验证 质粒和酵母菌质粒和酵母菌不携带纤维素酶基因。
（4）将 4 株菌株分别置于以纤维素作为唯一碳源的培养基上，其中菌株Ⅰ、Ⅱ不能存活，请解释菌株Ⅱ不能存活的原因 菌株Ⅱ中缺少信号肽编码序列，导致所产生的纤维素酶无法分泌到细胞外，分解细胞外的纤维素，使得细胞无可利用的碳源，由于菌株Ⅰ中导入的是普通质粒，其不能合成纤维素酶，不能利用培养基中的碳源，因此菌株Ⅰ和菌株Ⅱ因不能利用纤维素碳源不能存活菌株Ⅱ中缺少信号肽编码序列，导致所产生的纤维素酶无法分泌到细胞外，分解细胞外的纤维素，使得细胞无可利用的碳源，由于菌株Ⅰ中导入的是普通质粒，其不能合成纤维素酶，不能利用培养基中的碳源，因此菌株Ⅰ和菌株Ⅱ因不能利用纤维素碳源不能存活。
【答案】B；纤维素酶基因中存在BamHⅠ的酶切位点，因此不能选择BamHⅠ切割目的基因；只使用PstⅠ切割目的基因和质粒，可能出现目的基因或质粒的自身连接，因此为使纤维素酶基因能够与质粒有效组合，应选用最合适的限制酶是HindⅢ和PstⅠ；菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ；质粒和酵母菌；菌株Ⅱ中缺少信号肽编码序列，导致所产生的纤维素酶无法分泌到细胞外，分解细胞外的纤维素，使得细胞无可利用的碳源，由于菌株Ⅰ中导入的是普通质粒，其不能合成纤维素酶，不能利用培养基中的碳源，因此菌株Ⅰ和菌株Ⅱ因不能利用纤维素碳源不能存活
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：2引用：1难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
